邓 沁，吴 忠，彭 维，王永刚，苏薇薇

(中山大学生命科学学院∥广东省中药上市后质量与药效再评价工程技术研究中心，广东 广州510275)

尖吻蝮蛇凝血酶分离纯化新工艺研究*

邓 沁，吴 忠，彭 维，王永刚，苏薇薇

(中山大学生命科学学院∥广东省中药上市后质量与药效再评价工程技术研究中心，广东 广州510275)

尖吻蝮蛇凝血酶是从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化得到的一种类凝血酶，属于止血一类新药。建立了尖吻蝮蛇凝血酶分离纯化新工艺，采用切向流过滤技术，用两步离子交换层析分离得到高纯度的尖吻蝮蛇凝血酶，再采用两步凝胶排阻层析去除热原和脱盐。该工艺具有简便高效的特点，适合大规模工业化生产。

尖吻蝮蛇凝血酶；分离；纯化；工艺

尖吻蝮蛇凝血酶(Haemocoagulase Acutus，简写为Halase)是从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化的一种类凝血酶，它通过水解纤维蛋白的Aα链，使纤维蛋白原原降解为纤维蛋白单体，从而发挥凝血作用。研究表明尖吻蝮蛇凝血酶具有较强的止血作用，且无毒[1-4]。本团队建立了一种尖吻蝮蛇凝血酶分离纯化新工艺，采用切向流过滤技术，用两步离子交换层析分离得到高纯度的尖吻蝮蛇凝血酶，再采用两步凝胶排阻层析去除热原和脱盐；具有简便高效的特点，适合大规模工业化生产，现报道如下。

1 材 料

1.1 实验仪器

蛋白分离纯化仪：GE Healthcare Life Sciences公司(GE Healthcare)，型号：AKTA prime plus；层析柱：GE Healthcare，型号：XK 50/30、XK 50/60；膜过滤分离系统：GE Healthcare，型号：QuixStandand Benchtop System；微滤柱：GE Healthcare，型号：CFP-4-E-4MA(420 cm2，0.45 μm)；超滤柱：GE Healthcare，型号：UFP-10-E-4MA(420 cm2，10 NMWC)；层析柜：上海青浦沪西仪器厂，CXG-1；便携式pH计：OHAUS公司，型号：STARER 3000；……