周　莉， 王　芳, 刘　春, 梁惜梅， 姜　兰,李凯彬

(1 中国水产科学研究院 珠江水产研究所， 广东 广州 510380； 2 上海海洋大学 水产与生命学院，上海 201306)



条件性诱导转基因斑马鱼卵细胞的凋亡和消融

周莉1，2， 王芳1, 刘春1, 梁惜梅1， 姜兰1,李凯彬1

(1 中国水产科学研究院 珠江水产研究所， 广东 广州 510380； 2 上海海洋大学 水产与生命学院，上海 201306)

摘要：【目的】构建针对斑马鱼Danio rerio卵细胞的可诱导消融品系，并了解其卵巢组织在条件诱导下的去除规律和特性，为相关领域的应用提供材料基础。【方法】利用Tol2 转座系统建立卵细胞特异表达硝基还原酶(Nitroreductase，NTR)的转基因斑马鱼品系；通过定期采样，连续观察、解剖、组织切片等方法研究甲硝唑(Metronidazole，Mtz)对成熟雌鱼外观及卵巢结构的影响；冰冻切片结合TUNEL检测，了解条件性诱导对卵巢细胞凋亡的影响。【结果】获得囊胚细胞具特异荧光标记的转基因鱼，并形成稳定遗传品系。经Mtz诱导，该品系成熟雌鱼卵巢结构逐步退化、萎缩，卵母细胞渐渐消融，提示NTR在卵细胞特异表达；检测发现Mtz可导致卵细胞的凋亡，推测卵巢的组织变化为细胞凋亡所致；撤销Mtz胁迫卵巢可再生并恢复生育功能，说明卵巢的消融过程是可逆的。【结论】 获得的转基因斑马鱼可通过条件诱导实现卵巢消融与再生。

关键词：斑马鱼； 卵巢； 卵细胞； 消融； nfsB基因; 硝基还原酶； 甲硝唑

硝基还原酶B (Nitroreductase B，nfsB)基因源于大肠埃希菌EscherichiacoliB，其编码的硝基还原酶(Nitroreductase，NTR)蛋白能与包括甲硝唑(Metronidazole，Mtz)在内的含有硝基基团的化合物结合，产生具有细胞毒性的活性物质。……