HPLC法测定沙日毛都-8中栀子苷的含量

2016-05-20田利明乌兰察布市食品药品检验所乌兰察布012000

北方药学 2016年4期

田利明（乌兰察布市食品药品检验所　乌兰察布　012000）

田利明（乌兰察布市食品药品检验所乌兰察布012000）

摘要：目的：探讨沙日毛都-8中栀子苷的含量测定方法。方法：用A11tech C18色谱柱，以乙腈—水（12∶88）为流动相，检测波长为238nm。结果：栀子苷在0.1167～0.6503μg范围内呈良好的线性关系，平均回收率99.87%（n=6）。结论：用HPLC法测定沙日毛都-8中栀子苷的含量，方法简便易行，准确可靠。

关键词：HPLC沙日毛都-8栀子苷

沙日毛都-8是传统的蒙药制剂，由黄柏、香墨、栀子、甘草、红花、荜拨、牛胆粉、黑云香8味中药组成的复方蒙药制剂。栀子是方中主药，栀子含有栀子苷、羟异栀子苷等化合物，栀子苷是栀子的有效成分，故控制其含量有实际意义。本文采用高效液相色谱法精确快速地测定制剂中栀子的含量。

1　仪器与试药

1.1仪器：日本岛津LC-20AT型高压双泵、SIL-20A自动进样阀、SPD-20AT紫外-可见检测器、CTO-20A柱箱、LCsolution色谱数据工作站；KQ-100型超声波清洗器；电子天平BS210S（d= 0.1mg）。

1.2试剂与试药：栀子苷对照品中国药品生物制品检定所批号：110749-200512；甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水。沙日毛都-8（包头市达茂旗蒙医院制剂室）。

2　方法与结果

2.1色谱条件：采用Zorhax C1（84.6mm×250mm）色谱柱；柱温25℃；流动相：乙腈—水（12∶88）。检测波长238nm。流速：1.0mL/min；进样量20μL。

2.2对照品溶液的制备：精密量取栀子苷对照品，置于25mL容量瓶中，加流动相定容，制成30g/mL的溶液，作为对照品溶液。

2.3供试品溶液的制备：精密称定本品约0.3g，置具塞容量瓶中,精密加入甲醇25mL，密闭，称定重量，经超声波处理30min，放冷，再次称定重量，用甲醇补足减少的重量，摇匀，取上清液过0.45m微孔滤膜滤过，取滤液，备用。

2.4阴性对照溶液的制备：取自制不含栀子的空白制剂样品，按处方制备方法制成阴性对照溶液。

2.5系统适应性试验：在“2.1”色谱条件下，分别吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照液各10μL注入色谱仪，记录色谱图，沙日毛都-8中其他组分在栀子苷峰上无干扰，结果见图1、2、3。

2.6线性关系：精密吸取栀子苷对照品溶液2、4、6、8、10、12μL溶液分别进样，按“2.1”建立的色谱条件测定，以栀子苷浓度（μg/mL）为纵坐标，峰面积为横坐标作图，绘制工作曲线。表明栀子苷在0.1167～0.6503μg范围内呈良好线性关系。以对照品进样量（μg）为横坐标，峰面积为纵坐标,线性回归方程：Y= 1384583.2-12021.7X，r=0.9998.

2.7精密度试验：准确吸取30g/mL的对照品溶液10μL，重复6次进样，相对偏差RSD=0.44%，说明本实验精密度良好。

2.8重现性试验：取同一批样品6份，按“2.1”建立的色谱条件测定栀子苷的含量，样品平均含量为2.86mg/g，RSD=0.763%，结果表明，本方法重复性良好。

2.9稳定性试验：取同一供试品溶液，每间隔4h进样1次，在12h内栀子苷峰面积无变化，RSD为0.34%，结果表明，本方法稳定性良好。

2.10加样回收率试验：精密称定供试品（含量为1.896mg/g）0.5g，依法操作6份；分别精密加入栀子苷对照品溶液5mL（浓度为0.1324mg/mL），再分别精密加入甲醇20mL，按供试品溶液含量测定项下的方法操作，本方法平均回收率为99.95%，RSD= 0.79%。结果见表1。