关瑜 孙卫华

摘 要：目的：研究生物反应器培养人二倍体MRC-5细胞，并用来制备水痘疫苗的可行性。方法： 将MRC-5细胞接种1L生物反应器，使用GE公司Cytodex 1 微载体，浓度为：3g/L，工作体积300ml，待细胞长满单层后接种水痘病毒，当细胞病变约达75%以上时结束培养，收获细胞培养物及培养液，-80℃快速冻融一次，过滤除去微载体及细胞碎片，收获病毒悬液，测定水痘病毒滴度。结果： 细胞接种反应器后，大约3小时贴壁完成，5小时后开始伸展为长梭形，3天后细胞长成致密单层，接种水痘病毒后大约48小时病变，72小时收获。收获后的病毒滴度检测结果为120，000 PFU/mL。结论 ：二倍体细胞可以在生物反应器中正常生长，并且接种水痘病毒后产生病变，本试验证明了应用生物反应器动态培养二倍体细胞扩增水痘病毒，生产水痘疫苗的方法可行。

关键词：水痘；疫苗；生物反应器

中图分类号： Q-3.2 文献标识码： A 文章编号： 1673-1069（2016）15-195-2

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目前针对水痘和带状疱疹还没有有效的治疗方法，接种疫苗是预防水痘感染的唯一有效手段[1-2]。国外生产水痘疫苗采用细胞工厂工艺进行疫苗制造[3-4]，而国内生产水痘疫苗仍然采用传统的克氏瓶或转瓶工艺进行疫苗生产[5-6]。转瓶培养具有劳动强度大，占地空间大，单位体积提供细胞生长的表面积小，细胞生长密度低，瓶间差异较难控制等缺点，越来越不适应GMP和WHO认证的要求。生物反应器培养技术在国外已有四十多年的应用历史，近十年来在中国开始逐渐普及[7]。由于其便捷安全的操……