改良NAP活性检测在慢性阻塞性肺疾病急性加重期诊治中的应用价值

2016-05-12张金彪胡海涛刘玉欣刘刚张玉枝沧州中西医结合医院河北沧州0600沧州市人民医院

山东医药 2016年12期

张金彪，胡海涛，刘玉欣，刘刚，张玉枝(沧州中西医结合医院，河北沧州0600；沧州市人民医院)

张金彪1，胡海涛1，刘玉欣1，刘刚1，张玉枝2(1沧州中西医结合医院，河北沧州061001；2沧州市人民医院)

摘要：目的探讨改良中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)活性检测在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)合并细菌感染诊断、治疗及预后评估中的应用价值。方法以AECOPD患者121例作为观察组，其中细菌培养结果阳性50例、阴性71例，细菌培养阳性者给予常规抗炎治疗两周；另选慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者100例作为对照组。比较两组血清降钙素原(PCT)、NAP阳性率及NAP积分。结果观察组入院时NAP阳性率、NAP积分均高于对照组(P均<0.05)。观察组入院时细菌培养阳性患者NAP阳性率、NAP积分及血清PCT水平均高于阴性者(P均<0.05)；细菌培养阳性患者给予常规抗炎治疗期间死亡11例，完成抗炎治疗两周的患者治疗后NAP阳性率、NAP积分及血清PCT水平均低于治疗前(P均<0.05)。死亡者入院时NAP积分高于存活者(P<0.05)。结论AECOPD患者NAP活性增高，检测NAP活性有助于判断细菌感染及感染程度，并可用于评估预后。

关键词：慢性阻塞性肺疾病；慢性阻塞性肺疾病急性加重期；中性粒细胞碱性磷酸酶；降钙素原

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种以持续性气流受限为主要特征的慢性气道炎症性疾病，临床多见，老年人患病率高，但发病有年轻化趋势。慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)是COPD患者入院治疗及死亡的主要原因。AECOPD患者多为高龄，易合并细菌感染，增加临床诊断及治疗难度[1]。中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)主要存在于成熟的中性粒细胞胞质内，可以通过偶氮偶联染色法检测NAP活性；当细菌感染时其活性明显增加，在感染性疾病的诊断及预后判断方面有一定的价值。但由于染色步骤繁琐，耗时长，NAP检测在感染性疾病中的应用较少。本研究探讨改良NAP活性检测在AECOPD 合并细菌感染的诊断、治疗及预后评估中的应用价值。

1资料与方法

1.1临床资料选择2014年1～12月在沧州中西医结合医院ICU内住院治疗的AECOPD患者121例作为观察组，均符合《慢性阻塞性肺疾病诊治指南》[2]诊断标准。其中男77例、女44例，年龄38～88(67.5±4.0)岁；有吸烟史61例，纳入研究前均已停止吸烟≥6个月。本研究通过本院伦理委员会批准，患者均签订知情同意书。排除标准：①病程>5天；②胸部平片(X线)提示肺炎；③纳入本研究前1个月内使用抗生素类药物；④合并其他部位感染、其他慢性呼吸道疾病、需要机械通气支持的肺性脑病、肿瘤、免疫缺陷及器官功能不全。另选COPD患者100例作为对照组，男60例、女40例，年龄33～81(66.5±6.5)岁，均无吸烟史。两组性别、年龄具有可比性。

1.2细菌培养入院后采集痰标本，严格按照《全国临床检验操作规程》进行常规痰细菌培养，采用西门子MicroScan Walkaway 96plus全自动细菌鉴定药敏分析仪进行细菌鉴定及药物敏感试验。痰培养连续≥2次为同一细菌，定义为细菌感染阳性。细菌感染阳性50例、阴性71例。细菌培养阳性患者给予常规抗炎(注射用头孢曲松，2 g/24 h)治疗两周。

1.3相关指标观察①血清PCT：采集静脉血，采用酶联免疫荧光法检测血清PCT，操作步骤严格参照试剂盒说明书(深圳市新产业生物医学工程股份有限公司)。血清PCT>0.5 mg/L为阳性。② NAP阳性率及NAP积分：采集指尖血，涂片，采用NAP偶氮偶联快速改良方法进行NAP染色，计算NAP阳性率及积分[3]。NAP阳性率正常参考范围为60%～78%，积分正常参考范围为150～190。

2结果

观察组入院时NAP阳性率、NAP积分均高于对照组(P均<0.05)，见表1。观察组入院时细菌培养阳性患者NAP阳性率、NAP积分及血清PCT水平均高于阴性者(P均<0.05)；细菌感染阳性患者给予常规抗炎治疗期间死亡11例(病情发展快速，救治无效，抗炎1周后死亡)，完成两周抗炎治疗的细菌培养阳性患者NAP阳性率、NAP积分及血清PCT水平均低于治疗前(P均<0.05)；见表2。死亡者入院时NAP积分高于存活者(P<0.05)，NAP阳性率及血清PCT水平比较差异无统计学意义(P均>0.05)，见表3。

表1　　　　两组NAP阳性率、NAP积分及血清

注：与对照组比较，*P<0.05。

表2　　　　细菌感染阳性、阴性患者NAP阳性率、NAP积分

注：与细菌感染阴性者比较，*P<0.05；与治疗前比较，△P<0.05。

表3　　　　死亡与存活患者NAP阳性率、NAP积分

注：与存活患者比较，*P<0.05。

3讨论

AECOPD患者多为老年人，机体免疫功能及反应能力均下降，易受细菌入侵，引发感染，加重病情，增加病死率。有研究报道，80%的AECOPD由感染引起，其中70%为细菌感染[4]。判断细菌感染的指标较多，目前临床主要应用的是血常规、CRP、PCT等。其中PCT对诊断细菌感染具有特异性强、灵敏度高的特点，目前已广泛应用于临床细菌感染性疾病诊断及疗效判断[5～9]。研究发现，AECOPD患者细菌感染程度与血清PCT水平呈正相关[10]，可用于AECOPD等感染性疾病的诊断及病情判断[11～14]，但关于PCT对疾病预后判断方面的报道较少。

通过偶氮偶联染色法染色，NAP阳性物质呈浓蓝色、颗粒状。但是，常规NAP染色步骤复杂，限制其临床应用。本研究采用的NAP染色技术为NAP快速改良方法[15]，是对传统染色步骤进行一系列改良，具有省时、方便、效果好的优点。NAP染色可以鉴别诊断细菌或病毒感染，细菌感染时NAP活性增高，且染色强度与细菌感染程度呈正相关；病毒感染时NAP活性减低[16]。NAP阳性率及NAP积分是反映NAP活性的两项指标，当机体被细菌感染时，NAP阳性率及积分均升高，且后者对细菌感染诊断及病情评估更有意义[17]。

本研究结果显示，观察组入院时NAP阳性率、NAP积分均明显高于对照组；血清PCT水平亦高于对照组，但差异无统计学意义；说明NAP活性反映AECOPD患者细菌感染的敏感性强于PCT。细菌感染阳性的AECOPD患者NAP阳性率、NAP积分及血清PCT水平均明显高于细菌感染阴性者；经两周抗炎治疗后，NAP阳性率和NAP积分虽有明显下降，但仍高于正常值范围，而PCT水平几乎下降到正常范围；说明NAP、PCT均能反映细菌感染病情变化，但病情好转后NAP恢复较PCT慢，机制可能与NAP细胞质内颗粒酶的变性一直保持高水平有关[18]。

细菌感染阳性的AECOPD患者常规抗炎治疗期间死亡11例，死亡患者入院时NAP阳性率、NAP积分及血清PCT水平均高于存活患者，但仅NAP积分比较差异有统计学意义；说明NAP积分在判断预后方面具有重要参考价值。NAP积分越高，提示患者细菌感染程度越重或既往感染次数越多，因为细菌感染会导致中性粒细胞胞质内颗粒酶蛋白变性，变性的酶蛋白可通过染色方法检测出来。当细菌感染越严重或感染次数越多，酶蛋白变性越严重，NAP活性越强，患者预后不良。

总之，AECOPD患者NAP活性增高，检测NAP活性有助于判断其是否合并细菌感染及感染程度，并可用于评估预后。

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