王改萍，徐　涛，樊莉丽，彭方仁，吕　昕，陈琳月（南京林业大学林学院，江苏南京210037）



楸树花粉壁蛋白质提取及特异性

王改萍，徐涛，樊莉丽，彭方仁，吕昕，陈琳月
（南京林业大学林学院，江苏南京210037）

摘要：为了进一步研究楸树Catalpa bungei自交不亲和特性，以楸树不同产地植株云台山楸树（CB-1），老山楸树（CB-2）和滇楸Catalpa fargesi f.duclouxii（CF）的花粉为对象，利用普通研磨法及超声波破碎法，研究了适合于花粉壁蛋白质提取的方法。同时采用考马斯亮蓝染色法及聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）比较了不同树种花粉蛋白质质量分数及其主要蛋白质组分。结果表明：超声波破碎法适于花粉壁蛋白质的提取，最佳超声参数为功率400 W，超声时间3 s·次(－1)，间歇时间6 s·次(－1)，3个回合，工作120次，相隔5 min·回合(－1)。蛋白质提取液三羟甲基氨基甲烷（Tris-HCl）的pH 7.8最佳。不同树种的花粉壁蛋白质质量分数表现为滇楸最高，云台山楸树和老山楸树较低。蛋白质组分研究表明：各树种花粉共有蛋白质有26个，特异蛋白质为连楸53.8 kD，35.0 kD，23.4 kD，26.5 kD；老楸53.8 kD，38.5 kD，23.4 kD；滇楸38.5 kD，26.5 kD。图6表1参18

关键词：植物学；楸树；超声波破碎法；蛋白质；聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）

植物自交不亲和性（self-incompatibility，SI）是指植物的雌蕊柱头或花柱可以辩别自体和异体花粉，并抑制自体花粉萌发或生长的生理现象，是一种重要的防止植物近亲繁殖、增加变异的遗传机制［1］。花粉与柱头之间的识别和互作是重要的生殖过程，而花粉壁中许多蛋白在此过程中扮演着重要角色。成熟花粉可分为外壁和内壁两部分，两者都含有活性的蛋白质，外壁蛋白已被确定存在于成熟花粉的外壁腔隙内，并参与了花粉与柱头的黏附、识别及花粉水合、萌发等过程［2－5］。……