何顺伟，张耀刚，李超群，彭 源，魏晓星，#

(1.青海大学生态环境工程学院；2.青海大学医学院基础医学部，青海 西宁 810016 )

青南高原多房棘球蚴myophilin基因的克隆和序列分析*

何顺伟1，张耀刚2，李超群2，彭 源2，魏晓星1，2#

(1.青海大学生态环境工程学院；2.青海大学医学院基础医学部，青海 西宁 810016 )

目的 克隆多房棘球绦虫(Em)的myophilin基因并对其序列进行分析与预测。方法 提取Em原头节总RNA，采用RT-PCR技术扩增myophilin基因，将PCR产物连接入pGM-T载体，转化入DH 5α感受态细胞，挑选阳性克隆送测序。采用生物信息学软件对测序结果进行序列比对分析，同时预测编码蛋白的理化性质、二级结构、三级结构、翻译后修饰位点、结构域和抗原表位。结果 扩增出长度为576 bp的cDNA片段，包含完整开放阅读框(ORF)，编码190个氨基酸，与已知细粒棘球绦虫的序列同源性达99%。预测结果显示，编码蛋白分子式为C935H1519N255O285S11，理论分子质量为212 876，PI为8.66。α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲在二级结构中所占的比例分别为51.58%、10.00%和38.42%。含有10个翻译后修饰位点，各1个Calponin结构域和CH结构域，8个B细胞抗原表位和6个T细胞抗原表位。结论 成功克隆出Em的myophilin基因并对其进行了有效分析和预测。

多房棘球蚴 亲肌肉抗原 基因 克隆 序列 分析

细粒棘球绦虫(Echinococcosis granulosa，Eg)和多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis，Em)的幼虫感染机体可分别引发囊型包虫病(Cystic echinococcosis，CE)和泡型包虫病(Alveolar echinococcosis，AE)，是我国西北畜牧地区流行的人畜共患寄生虫病。近年来，免疫诊断和疫苗预防研究是包虫病防控研究的重点[1]。而寻找灵敏特异的抗原是包虫病免疫诊断和疫苗预防的基础和前提[2]。……