韩晓勇 尚金星 赵志煌 王希瑞 尹港峰

沧州市中心医院神经外三科 河北省沧州市 061000

Rac1降低胶质瘤手术联合放化疗敏感性

韩晓勇 尚金星 赵志煌 王希瑞 尹港峰

沧州市中心医院神经外三科 河北省沧州市 061000

目的：探讨胶质瘤术后放化疗敏感性与Rac1表达的关系。方法：选取我院胶质瘤患者30例，术中均留取标本，术后均经过常规放化疗治疗。PCR检测30例胶质瘤标本Rac1的表达量，并随访统计30例患者复发率。利用X2检验，分析胶质瘤中Rac1表达的高低与胶质瘤术后患者经放化疗治疗后复发率的关系。结果：Rac1高表达的胶质瘤患者经术后放化疗后复发率较Rac1低表达的胶质瘤患者明显增加，差异具有统计学意义。结论：Rac1高表达的胶质瘤术后放化疗敏感性降低。

胶质瘤；Rac1；放化疗

脑胶质瘤是脑原发性肿瘤中发病率最高并且在治疗上最困难的一类肿瘤。目前对于脑胶质瘤复发的具体机制尚不明确。有研究发现，Rac1的表达有胶质瘤的侵袭和迁移能力密切相关。本文随访收集我院神经外科2012-2013年手术联合放化疗综合治疗的胶质瘤患者30例，初步探讨胶质瘤患者术后经放化疗后的复发率与Rac1表达的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集沧州市中心医院2012-2013年30例胶质瘤患者手术切除的胶质瘤标本，将所取新鲜标本装入冻存管中，置入液氮保存。 30例胶质瘤患者，其中男性18例，女性12例，年龄：26-65岁，平均年龄43.5岁。根据WHO神经系统肿瘤分型（2007年版）进行分级，其中Ⅰ级2例，Ⅱ级11例，Ⅲ级13例，Ⅳ级4例，取癫痫患者颞叶脑组织8例，作为对照组。所有患者均为首发胶质瘤，术前均未行放化疗。

1.2 治疗方法

所有患者均行开颅手术治疗，所选30例患者均为术中肿瘤完全切除。术后经放疗科正规放疗，并同期行化疗。化疗方案采用尼莫司汀或替莫唑胺。

1.3 RT-PCR检测胶质瘤组织中Rac1 mRNA水平

从液氮中取出冰冻胶质瘤组织按照Trizol说明书提取U251细胞总RNA，进行RNA的浓度、纯度及完整性的测定。用二步法扩增目的基因，参照文献 Rac1的引物序列为：上游引物5’-TGACCAATACTGACCCTCTTTACCT-3’，下游引物5’-CATCAATAGGCAAAG CGACTACA-3’；内参β-actin的引物序列为：上游引物5’-ATGTGGCCGAGGACT TTGAT-3’，下游引物5’TGGCTTTTAG GATGGCAAGG-3’。Rac1和β-actin的扩增产物长度分别为：71bp和100bp。扩增条件：94℃激活5min，94℃变性30S，52℃退火60S，72℃延伸90S，30个循环，72℃继续延伸5min。取RT-PCR产物在2%琼脂糖凝胶上电泳(80V，30min)，用凝胶图像分析软件分析结果，取其积分吸光度值，目的基因与β-actin的比值为相对表达水平，每组重复实验3次，结果采用均数±标准差表示。

1.4 随访及统计学方法

随访采取门诊复查方法，以治疗后3-6个月复查增强核磁共振为依据判断肿瘤复发情况。采用SPSSl6.0统计软件进行统计学分析。比较采用t检验和X2检验，以P<0.05认为差异有统计学意义。

2 结果

（1）为了检测胶质瘤标本中Rac1的表达情况，我们通过RT-PCR方法测得30例胶质瘤标本中Rac1对比内参的平均相对表达量为37.53±7.14%，而正常脑组织的Rac1对比内参的相对表达量为7.33±2.51%。可见胶质瘤中的Rac1表达量较正常脑组织表达量明显增高，且差异具有统计学意义（P=0.008）。

（2）为了比较Rac1的表达和胶质瘤复发率的关系，我们根据已测得的胶质瘤平均相对表达量，将胶质瘤标本分为两组。具体方法为：以Rac1表达量高于平均值者为高表达组，低于平均值者为低表达组。高表达组18例，Rac1平均表达量为46.23±8.29%；低表达组12例，Rac1平均表达量为18.62±5.82%。根据随访结果，高表达组18例复发14例，复发率为77.78%；低表达组12例，复发5例，复发率为41.67%。可见Rac1高表达组的复发率明显增加，利用四格表卡方检验分析认为差异具有统计学意义（p=0.043）。

3 讨论

脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤之一，由于其高度侵袭性生长的特点，使得单纯的手术治疗方法无法将肿瘤组织切除完全。术后的放化疗也就成为了胶质瘤综合治疗的重要组成部分[1]。胶质瘤患者术后经正规合理的放化疗的综合治疗，总体上可以改善生存，但仍存在部分肿瘤早期复发的情况[2]。

Rac1作为一种重要的细胞信号转导分子，其广泛存在于人体各种细胞内，并且与人类多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关。胶质瘤的高侵袭性与高迁移能力是胶质瘤复发和耐药性的密切相关因素。胶质瘤的高侵袭性与高迁移能力可能是胶质瘤术后残留，逃避放疗和产生耐药性的重要原因。我们研究发现在胶质瘤组织中，Rac1的表达量显著高于正常脑组织。并且，Rac1高表达组的胶质瘤患者在术后和联合放化疗后的复发率要明显高于Rac1低表达组。这说明，Rac1的高表达可能与胶质瘤治疗后的复发密切相关，但具体机制有待进一步研究。

[1]齐春晓，王宁.恶性胶质瘤放化疗后假性进展的研究现状[J].中华临床医师杂志,2013,7(18):8425-8427.

[2]肖锋,王洪林.脑胶质瘤放化疗研究进展[J].中国医药指南,2012,10(02):54-55.