王巍炜，胡早秀，王德光，张勇

(昆明医科大学第三附属医院，昆明650118)



云南宣威地区与其他地区肺腺癌患者肿瘤组织中ERCC1表达比较

王巍炜，胡早秀，王德光，张勇

(昆明医科大学第三附属医院，昆明650118)

目的 比较云南宣威地区与其他地区肺腺癌患者肿瘤组织中核苷酸切除修复交叉互补组基因1(ERCC1)表达的差异。方法选择62例云南宣威地区肺腺癌患者(观察组)和87例云南非宣威地区肺腺癌患者(对照组)，取手术切除的肿瘤组织标本，采用免疫组化方法检测肺腺癌组织中ERCC1表达。结果观察组与对照组肿瘤组织中ERCC1蛋白表达的阳性率分别为75.8%、29.9%，观察组高于对照组(P<0.01)；两组肿瘤组织中ERCC阳性细胞的灰度值分别为63±15.8、117±19.4，观察组低于对照组(P<0.01)。结论云南宣威地区肺腺癌患者较其他地区肿瘤组织中ERCC1呈高表达。

肺腺癌；核苷酸切除修复交叉互补组基因1；肿瘤耐药；云南宣威

肺癌是目前发病率和病死率最高的恶性肿瘤。我国云南省宣威地区是世界肺癌高发地区之一，其中高发人群多为农村患者，组织学类型以肺腺癌最常见[1，2]。顺铂是肺癌化疗的标准一线用药之一，然而当核苷酸切除修复交叉互补组基因1(ERCC1)高表达时，细胞容易修复顺铂所致的DNA损伤，表现为肿瘤耐药[3，4]。2010年5月～2015年5月，我们对云南宣威地区与其他地区肺腺癌患者肿瘤组织中ERCC1的表达情况进行比较。现报告如下。

1　资料与方法

1.1临床资料选择2010年5月～2015年5月在我院接受肺癌根治术治疗的151例患者，均经病理检查证实为原发性肺腺癌。其中云南宣威地区患者64例(观察组)，男31例、女33例，中位年龄66岁，按照AJCC 2014版肺癌分期标准，Ⅰ期29例、Ⅱ期35例；云南非宣威地区患者87例(对照组)，男41例、女46例，中位年龄64岁，肺癌分期Ⅰ期39例、Ⅱ期48例。两组性别、年龄、肿瘤病理分期具有可比性。

1.2检测方法取手术切除的肿瘤组织标本，甲醛固定，石蜡包埋。SP免疫组化法染色，DAB显色，苏木素复染，梯度乙醇干燥，二甲苯透明，以已知阳性切片作为阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。ERCC1鼠抗人单克隆抗体为美国Labvision生物公司生产。抗体稀释度为1∶120，抗原修复采用柠檬酸缓冲液微波修复。以已知阳性胃癌片作为阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。应用HPIAS-1000高清晰病理图像分析系统对免疫组化结果进行分析。以细胞核呈棕黄色颗粒为阳性细胞，每张切片随机选取10个高倍视野，计数每个视野中ERCC1表达呈阳性的肿瘤细胞数和该视野下肿瘤细胞总数，计算肿瘤细胞ERCC1阳性表达率。使用HPIAS-1000高清晰病理图像分析系统测定每张切片阳性细胞的灰度值，计算平均灰度。平均灰度值越高提示其表达越弱。

1.3统计学方法采用SPSS13.5统计软件。计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2　结果

ERCC1阳性表达主要定位于细胞核，呈棕黄色颗粒状。151例云南肺腺癌标本中ERCC1阳性表达73例，阳性表达率为48.3%。其中观察组阳性表达47例，阳性表达率为73.4%；对照组为26例、29.9%。两组阳性表达率比较，P<0.05。两组平均灰度分别为63±15.8、117±19.4，组间比较P<0.05。

3　讨论

顺铂作为一种非特异性细胞周期药物，可作用于肺癌细胞周期的各个阶段，尤其是在DNA合成期和有丝分裂期其作用更强[5]。因此，顺铂联合第三代化疗药物对晚期非小细胞肺癌进行治疗已经成为标准的一线治疗方案[6，7]。然而，仍有部分患者对铂类表现为原发性和继发性的耐药。研究显示，肿瘤细胞过强的DNA损伤修复与肿瘤耐药形成有关，核酸切除修复(NER)是DNA损伤修复的重要途径。顺铂主要通过和细胞DNA双链偶合形成加合物或形成链间交叉连接而损伤DNA，进而诱导凋亡，杀灭肿瘤细胞。而ERCC1在NER途径中起着DNA损伤识别和链间切割的关键作用。基础研究表明，将敲除ERCC1基因的肺癌细胞进行体外培养，该细胞不能修复顺铂所致的DNA损伤[8，9]。临床研究也证实，当肺癌组织中ERCC1表达过强时，采用顺铂为基础的化疗联合方案疗效较差[10～12]。

宣威地区作为世界肺癌点状高发区域，前期研究已发现其在致病因素、遗传易感性等诸多方面有自身的特点。在宣威地区煤层中发现了高致癌的纳米级石英，这种纳米级石英具有放射性，树鼩极易被其诱导患肺癌[13]。而在前期研究中也发现，宣威地区患者中制止细胞凋亡蛋白家族中的生存素也呈现出高表达的状态，提示宣威地区患者可能在基因方面存在易感性[14，15]。本研究显示，不论是宣威地区还是非宣威地区的肺腺癌患者，都存在不同程度的ERCC1蛋白表达；宣威地区肺腺癌患者ERCC1表达阳性率明显高于非宣威地区肺腺癌患者。提示我们在宣威肺腺癌患者的治疗策略选择上要多加考虑，特别是在目前以表皮生长因子接受器的酪氨酸激酶抑制剂为代表的靶向药物取得良好效果的时候[16]。对于ERCC1表达阳性、EGFR突变表达也为阳性的患者，如果一线治疗仍然采用传统的铂类联合第三代化疗药物，可能因耐药造成疗效不佳，那么一线使用TKI治疗应该能取得更好的疗效。对于ERCC1表达阳性的肺腺癌患者，采用培美曲塞联合非铂药物治疗能否取得更好的治疗效果也值得进一步研究证实。

综上所述，宣威地区肺腺癌患者中ERCC1呈现高表达，导致了铂类药物的耐药。提示我们在制定这类患者的治疗策略时要给予更高的关注。

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云南省科技厅-昆明医科大学联合专项基金(2013FB164)；昆明医科大学第三附属医院博士研究基金(BS55201510)。

张勇(E-mail: zhangyonghh@126.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.22.025

R734.2

B

1002-266X(2016)22-0067-02

2015-12-19)