魏岩冰，韩泽广,2,3

(1上海交通大学医学院附属瑞金医院，上海200025；2国家人类基因组南方研究中心；3上海交通大学系统生物医学院)



EBLN2基因对肝癌细胞增殖的抑制作用及其机制

魏岩冰1，韩泽广1,2,3

(1上海交通大学医学院附属瑞金医院，上海200025；2国家人类基因组南方研究中心；3上海交通大学系统生物医学院)

目的 探讨人类内源性非逆转录博纳病毒样核蛋白序列2(EBLN2)基因对肝癌细胞增殖的抑制作用及其机制。方法 采用实时定量RT-PCR技术和蛋白印迹技术检测EBLN2基因在肝癌细胞系(HepG2、SK-hep-1、Huh7、Hep3B、MHCC-97H、PLC/PRF/5、Focus、SMMC7721、YY-8103、LO2)和人肝癌组织样本中的表达；选取EBLN2表达水平较低的肝癌细胞株Focus和YY-8103进行外转质粒过表达，Pcmv-EBLN2重组质粒转入肝癌细胞株Focus和YY-8103，24 h观察EBLN2基因过表达对肝癌细胞株细胞增殖、平板克隆形成能力及软琼脂克隆形成能力、细胞周期的影响。结果 定量和半定量PCR实验结果表明EBLN2基因在59%的肝癌样本中表达下调，且在10株肝癌细胞系(HepG2、SK-hep-1、Huh7、Hep3B、MHCC-97H、PLC/PRF/5、Focus、SMMC7721、YY-8103、LO2)中表达水平与正常肝组织相比明显下调，依次下调48%、73%、72%、79%、84%、72%、87%、74%、82%、80%，P均<0.05；Pcmv-EBLN2质粒转染肝癌细胞株YY-8103和Focus 24 h后，肝癌细胞株YY-8103和Focus的细胞增殖率分别为72.2%、85.0%，平板克隆形成率分别为52.6%、25.6%，软琼脂克隆形成率分别为40.9%、37.5%，与空白对照相比，P均<0.05；肝癌细胞株YY-8103和Focus从G1期进入S期受到抑制。结论 EBLN2基因在肝癌组织中表达下调，其可能通过调节细胞周期抑制肝癌细胞增殖。

肝细胞癌；人类内源性非逆转录博纳病毒样核蛋白序列2基因；抑癌基因；细胞增殖

肝细胞癌(HCC)是肝癌最常见亚型，占肝癌确诊和致死人数的70%～80%。尽管近年来肝癌治疗手段不断发展，但5年致死率仍约7%[1～5]。因此，研究肝癌发生的分子机制，尤其针对最新发现的癌基因和抑癌基因在癌症发生发展中的作用对肝癌诊断、治疗有重要意义[6, 7]。人类内源性非逆转录博纳病毒样核蛋白序列(EBLNs)基因是最近研究发现的远古时期博纳病毒核蛋白基因整合到人类染色体上并稳定存在的基因家族[8～10]。……