汪枫，喻小兰，夏纪毅，3，王晓燕，唐利，曹勇，唐小平，夏国栋

(1西南医科大学附属医院，四川泸州646000；2西南医科大学附属中医医院；3西南医科大学肿瘤研究所)



·论著·

黄芩素、LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响

汪枫1，喻小兰2，夏纪毅1，3，王晓燕1，唐利1，曹勇1，唐小平1，夏国栋1

(1西南医科大学附属医院，四川泸州646000；2西南医科大学附属中医医院；3西南医科大学肿瘤研究所)

目的 探讨黄芩素和PI3K特异性抑制剂LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响。方法 体外培养SMMC-7721细胞， 20 μmol/L DMSO及0、1、5、10、20 μmol/L黄芩素分别处理SMMC-7721细胞，显微镜观察细胞数量变化； 20 μmol/L DMSO及0、1、2、5、10、20、50、100、200和300 μmol/L黄芩素和0、1、2、5、10、20、30 μmol/L的LY294002处理SMMC-7721细胞24 h，CCK8法检测细胞增殖活性。将SMMC-7721细胞随机分为4组，A组加入0 μmol/L黄芩素；B组加20 μmol/L DMSO；C组加20 μmol/L黄芩素；D组加20 μmol/L黄芩素和 10 μmol/L LY294002，培养24 h，流式细胞术检测细胞周期并计算细胞凋亡比例、RT- PCR法和Western blotting法检测凋亡相关因子Bcl-2、Bax mRNA和蛋白表达及p-AKT活性。 结果 SMMC-7721细胞数量随黄芩素/LY294002浓度增加而显著减少，细胞增殖活性明显降低(P均<0.05)。与A、B组相比，C、D组的G0～G1期细胞比例明显增多(P<0.05)，S期细胞比例明显下降，G2/M期细胞变化无统计学意义(P>0.05)，C、D组G0～G1期细胞升高比例、S期细胞降低比例比较，P<均0.05。与A组和B组相比，C、D组早期凋亡和晚期凋亡细胞均明显增多(P均<0.05)，D组比C组早期凋亡和晚期凋亡细胞增多更明显(P<0.05)。与A、B组相比，C、D组抑制凋亡因子Bcl-2 mRNA水平显著降低(P<0.05)，凋亡促进因子Bax mRNA水平显著增高(P<0.05)；D组Bcl-2 mRNA水平比C组降低更明显，而Bax mRNA水平比C组升高更明显(P均<0.05)。与A、B组相比，C、D组凋亡抑制因子Bcl-2表达量和AKT磷酸化水平显著降低(P均<0.05)，凋亡促进因子Bax表达量显著增高(P均<0.05)，D组凋亡抑制因子Bcl-2表达量和AKT磷酸化水平降低比C组更明显(P均<0.05)，凋亡促进因子Bax表达量升高比C组更明显(P均<0.05)。结论 黄芩素与LY294002可能通过调控凋亡相关因子的表达及增加活化的AKT水平从而诱导SMMC-7721细胞凋亡，抑制其增殖，且二者有协同效应。

肝癌；黄芩素；磷酸肌醇3激酶抑制剂；人肝癌细胞系SMMC-7721细胞；细胞凋亡

原发性肝细胞癌(HCC)临床常用的治疗方法有手术、放疗和化疗[1]。但肝癌易转移及复发，对化疗药物易产生耐药性，临床疗效和预后不理想，因此，寻找新的药物和分子治疗靶点是治疗肝癌的关键[2]。磷酸肌醇3激酶(PI3K)/AKT信号通路是参与多种癌细胞恶性增殖、分化、凋亡、心血管形成和侵袭转移的重要信号通路，多种药物诱导肝癌细胞凋亡均通过干扰PI3K/AKT信号通路[3]。……