西安市中心医院呼吸科(西安710003)　邵景韫　刘　安　杜旭升　白　洁　陈明伟



肺间质纤维化患者的PAI-1、VEGF的变化*

西安市中心医院呼吸科(西安710003)邵景韫刘安杜旭升白洁陈明伟△

摘要目的:探讨纤溶酶原激活剂抑制剂-1 (PAI-1)、血管内皮生长因子(VEGF)在肺间质纤维化发病机制中的作用。方法：选择肺间质纤维化患者40例，健康人40例，采用ELISA法测定其血清及肺泡灌洗液的PAI-1、VEGF。结果：肺纤维化患者的肺泡灌洗液中的PAI-1水平为3.736±0.485μg/L，比健康人的1.245±0.126μg/L明显增高(P<0.05)；肺纤维化患者的肺泡灌洗液中的VEGF水平为3.236±0.133μg/L，比健康人的1.545±0.231μg/L明显增高 (P<0.05)；肺纤维化患者的血清PAI-1水平为58.486±0.148μg/L，较健康对照组的45.383±0.119μg/L明显增高(P<0.01)；肺纤维化患者的血清VEGF水平为0.530±0.048μg/L，较健康对照组的0.423±0.069μg/L明显增高(P<0.05)。结论:肺纤维化组PAI-1、VEGF水平明显升高，推测其参与了肺间质纤维化的形成。

主题词肺纤维化/血液纤溶酶原激活物抑制物-1/代谢血管生成因子/代谢内皮，血管

特发性肺纤维化(Idiopathic plumonary fibrosis，IPF)是临床常见的一种慢性间质性肺疾病，发病隐匿、进展迅速、病死率高，严重影响患者生存质量及预后[1]。其发病机制不明确，多种细胞因子在肺纤维化中起到关键性作用，如转化生长因子-β(TGF-β)，纤溶酶原激活剂抑制剂-1(PAI-1)等。血管生成在肺纤维化形成中起关键作用，但血管内皮生长因(VEGF)在肺纤维化中的研究较少。检测肺纤维化患者的血清、肺泡灌洗液中的PAI-1、VEGF的变化，以探讨其在肺纤维化发病机制中的作用。

资料与方法

1一般资料选择2012年1月至2015年12月我院呼吸内科IPF组患者40例，其中男26例，女14例，年龄46～73岁，平均51.5±13.6岁；病程3.0～15.0年，平均12.73.7年；IPF诊断依据IPF循证医学诊治指南[2]，结合病史、临床表现、BALF、胸部HRCT及支气管肺活检及临床治疗等诊断。健康对照组40例，其中男30例，女10例，年龄39～70岁，平均48.5±11.4岁；18例为健康志愿者，22例有干咳、胸闷症状，胸部HRCT、肺功能、BALF等检查正常，除外器质性疾病。

2研究方法

2.1BALF及血液采集和处理：BALF操作参考美国胸科协会官方指南[3]，用Olympus电子支气管镜操作BALF，回收BALF无菌纱布过滤除去粘液，离心，上清-70℃储存待测。清晨采集空腹静脉血抗凝，离心，血液分离后置-70℃保存待测。研究符合西安交通大学医学院科研伦理要求，所有患者签署知情同意书。

2.2PAI-1、VEGF测定：PAI-1 ELISA试剂盒购置于北京太阳公司，VEGF ELISA试剂盒购置于武汉博士德公司，采用酶联免疫吸附法测定，按说明书进行操作。

结果

1两组BALF中PAI-1、VEGF的变化对比肺纤维化患者的肺泡灌洗液中的PAI-1 水平为3.736±0.485μg/L，比健康人的1.245±0.126μg/L明显增高(P<0.05)；肺纤维化患者的肺泡灌洗液中的VEGF水平为3.236±0.133μg/L，比健康人的1.545±0.231μg/L明显增高 (P<0.05)。

2两组血清中PAI-1、VEGF的变化对比肺纤维化患者的血清PAI-1水平为58.486±0.148μg/L，较健康对照组的45.383±0.119μg/L 明显增高(P<0.01)；肺纤维化患者的血清VEGF水平为0.530±0.048μg/L，较健康对照组的0.423±0.069μg/L明显增高(P<0.05)。

讨论

肺间质纤维化是一种原因不明的慢性间质性肺疾病中常见代表性疾病，呈进行性发展，致呼吸衰竭死亡，其发病机制不明确，无有效治疗手段，预后差[4]。研究肺纤维化中的各种细胞因子的作用，对其发病机制及诊治有应用价值。

PAI为丝氨酸蛋白水解酶抑制剂，是组织型和尿激酶型纤溶酶原激活物的抑制因子。PAI-1缺失减轻肺纤维化主要通过纤溶酶的纤溶作用。气管内滴入PAI-1siRNA减少纤维化肺组织胶原沉积[5]，PAl-1促进成纤维细胞增殖和胶原合成[6]，促进肺纤维化的发生、发展。PAI可调节体内白细胞、纤维母细胞的粘附、移行，与TGF-β、TNF-α、PDGF相互作用，促进肺纤维化发展。PAI-1缺失减轻肺纤维化主要通过纤溶酶的纤溶作用。Eitzan发现PAI-1缺陷的小鼠气管内灌注博莱霉素，肺纤维化减低。气管内滴注重组uPA可减轻肺纤维化程度，使纤溶活性升高，胶原减少。Eitzman等用BLM致肺纤维化的转基因大鼠模型证实了肺纤维化的程度与PAI-1的基因表达呈明显正相关，本研究表明，肺纤维化患者的血清、BALF中的PAI-1水平比健康人明显增高，表明存在纤溶抑制活性增强，PAI-1参与肺纤维化。

血管内皮生长因子(Vascularendothelialgrowthfactor，VEGF) 是最主要的血管生成因子，能够促进血管内皮细胞分裂、增殖，促进新的血管生成，以增加血管通透性、维持血管完整性，参与肺纤维化的形成。健康人VEGF主要在肺内合成，在肺内可由上皮细胞、巨噬细胞、血管内皮细胞、肺间质细胞分泌。大鼠肺纤维化中VEGF增高，肺纤维化肺泡炎期VEGF的阳性表达与血管密度的增致加一。VEGF有抗凋亡作用，是维持内皮细胞存活的重要因子，损伤的血管内皮促进VEGF合成和释放增加，低氧可诱导VEGF的表达，肺纤维化中高水平的VEGF可能是对低氧的反应。VEGF通过上调TGF-β1表达促进支气管周围纤维化，在肺纤维化形成中过度表达，通过促进上皮间质转化促进肺纤维化。

本研究发现：肺纤维化组血清、肺泡灌洗液中的PAI-1、VEGF明显高于健康对照组。说明PAI-1、VEGF参与了肺纤维化的形成，抗VEGF、PAI-1可能成为治疗肺纤维化的新途径。

参考文献

[1]高 丽，代华平.特发性肺纤维化诊治进展[J].内科急危重症杂志2015，2l(5)：327-329.

[2]ATS/ERS/JRS/ALAT Committee on Idiopathic Pulmonary Fibrosis.An official ATS/ERS/JRS/ALAT statement:idiopathic pulmonary fibrosis:evidence-based guidelines for diagnosis and management[J].Am J Respir Crit Care Med,2011,183(6):788-824.

[3]美国胸科协会官方指南·支气管肺泡灌洗液的细胞学分析在间质性肺疾病中的临床应用(摘译本)[J].中华结核和呼吸杂志,2012,35(9):650-654.

[4]Jordan RC,Erin EM.Recent evidence for pharmacological treatment of idiopathic pulmonary fibrosis[J].Annals of Pharmacotherapy,2014,48(12):1611-1619.

[5]Zhang YP,Li WB,Wang WL,etal.siRNA against plasminogen activator inhibitor-1 ameliorates bleomycin-induced lung fibrosis in rats[J].Acta Pharmacol Sin，2012，33(7)：897-908.

[6]张彦萍,王卫丽,刘建,等.纤维溶解酶原激活物抑制剂-1对大鼠胚肺成纤维细胞的影响[J].中华结核和呼吸杂志,2011,34(7):500-503.

(收稿：2016-03-28)

通讯作者：△西安交通大学第一附属医院呼吸科

【中图分类号】R563

【文献标识码】A

doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2016.08.007

*陕西省科技研究发展计划(2014KCT-23)

陕西省西安市科技计划项目[SF1316(1)]