王忠琴

（辉南县辉发城镇畜牧兽医站，吉林通化135100）

传染性牛支原体肺炎流行的诊断方法

王忠琴

（辉南县辉发城镇畜牧兽医站，吉林通化135100）

本文主要探讨传染性牛支原体肺炎流行的诊断方法，分析了辉南县2013年新引进育肥肉牛呼吸道传染病进行病原学研究。总结传染性牛支原体肺炎防治当中要找准原因，加强疾病预防和饲养管理，早诊断早治疗，以此增强传染病防治效果。

传染性；支原体肺炎；诊断

牛支原体是危害养牛业的重要致病性支原体，目前已证实该病原体呈世界性分布，可导致牛群发生多种病症，致死率高，常规抗生素治疗效果差，且病情容易反复，犊牛及体弱牛病死亡率高［1］。

1 资料与方法

1.1 样本采集

采集血液和肺等各种内脏器官作为检查标本。采集途径：重症病牛或死后不久病牛，剖检取样；依据养殖户病情报告剖检具有典型症状病牛取样；养殖户直接送检病牛。

1.2 检测方法

1.2.1 支原体培养鉴定在PPLO固体培养基（Sigma公司生产）上涂抹小块组织样本，操作均在无菌环境中进行，培养基中放置PPLO肉汤粉（BD公司）、琼脂粉（BD公司）、酵母粉（BD公司），并将于含5%二氧化碳的细胞培养箱中放置固体培养基进行培养并采用光学显微镜观察。鉴定标准：支原体菌落形态发生变化，液体培养基发生颜色变化。

1.2.2 支原体种群鉴定在150毫升灭菌水的Ep-pendorf管中放入小块带支原体菌落的琼脂，先煮沸10分钟，再冰浴1分钟，行血清分离后取上清作为DNA模板。采用16SrRNA通用引物进行PCR扩增，其产物克隆至质粒pMD18-T中，通过专业生物工程技术公司进行序列测定。……