李 京,张祥林,王 翀,李亚伟,张小菊

(1.新疆出入境检验检疫局，乌鲁木齐830063；2.新疆农业大学农学院，乌鲁木齐830052)



菠菜霜霉病菌快速分子检测方法研究

李 京1,2,张祥林1,王 翀1,李亚伟1,张小菊1

(1.新疆出入境检验检疫局，乌鲁木齐830063；2.新疆农业大学农学院，乌鲁木齐830052)

摘要：【目的】菠菜霜霉病，由专性寄生病原菌Peronospora farinosa f. sp. Spinaciae引起，是世界上菠菜Spinacia oleracea种植中最为重要的经济型病害。建立菠菜霜霉病菌快速分子检测方法。【方法】将菠菜霜霉病菌进行显微镜的形态鉴定；提取DNA、PCR扩增、克隆、酶切、测序、序列比对与分析；采用巢式PCR技术检测菠菜霜霉病:第一轮采用通用引物ITS1/ITS4，第二轮采用特异性引物SMPF/SMPR。【结果】该菌与霜霉属的形态特征描述一致，确定菠菜患有霜霉病；测序结果经Blast比对分析与Peronospora effusa同源性达100%；巢式PCR技术也特异性的检测到了菠菜霜霉病菌。【结论】建立针对菠菜霜霉病的快速分子检测技术。

关键词:菠菜霜霉病、酶切、巢式PCR

0引 言

【研究意义】菠菜霜霉病是由专性寄生菌Peronosporafarinosaf. sp.Spinaciae引起，该病在全世界的菠菜种植中都是一种毁灭性的病害[1,2]。菠菜霜霉病是一种多发性真菌病害，尤其在气候冷且多雨的情况下发病率高，传播速度快[3]。【前人研究进展】对于菠菜霜霉病分子方面的研究国外报道较多，Young-Joon CHOI等[4]对引起菠菜霜霉病的病原Peronosporaeffusa以及霜霉属的其他种结合病原的形态特征做了同源性分析。Klosterman, S. J.等[5]采用了ASP-PCR的方法成功将引起菠菜霜霉病的病原Peronosporaeffusa与引起甜菜霜霉病的病原Peronosporaschachtii检测出来。【本研究切入点】国内对于菠菜霜霉病的分子检测技术目前还没有相关报道，大部分报道是针对菠菜霜霉病的形态特征及防止措施。……