段星娥 杨红润

【摘要】目的 利用分子生物学方法研究云南省肠道病毒EV71基因序列特征。方法 采集患儿发病7天内的粪便样本，经生物公司试剂盒验证为EV71感染，设计合成8对引物扩增合成，扩增产物经测序后拼接，对拼接结果进行分析，并与其他已发表的EV71全基因组序列进行同源性对比；构建系统进化树。结果 得到了云南省EV71全基因序列。结论 通过测序结果分析确定EV71病毒株与上海、北京、杭州EV71病毒株亲缘关系最接近，同属于C3亚型

【中图分类号】R-1 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2016）01-0181-02

手足口病（Hand foot mouth disease ， HFMD） 是婴幼儿常见的传染病，由肠道病毒引起，临床上以发热和手、足、口腔等部位出现皮疹、溃疡等表现为主，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。

引起本病的肠道病毒有20 多种（型），均属微小核糖核酸病毒科、人肠道病毒属。其中柯萨奇病毒（Coxasckievirus） A16 型（CoxA16） 和肠道病毒71 型（ Enterovirus71，EV71） 最常见。有关EV71 感染的报道始于20 世纪70 年代初，1969 年EV71 型在美国被首次确认。此后，EV71 感染与CA16 感染交替出现，成为手足口病的主要病原体。2008年来全国多个省份暴发儿童手足口病，云南地区手足口病例数亦呈骤增趋势，手足口病治疗和预防任务十分艰巨，掌握云南地区儿童手足口病的病原体分子生物学资料刻不容缓。

一、材料与方法

1.1. 样本采集

收集医院手足口病患儿粪便样本，于病人发病7天内采集，5～8g/份，采集后立即放入无菌采便管保存。

1.2. 临床样本鉴定

采用中山大学达安基因股份有限公司肠道病毒71型核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）检测临床样本，确定其为含有EV71病毒株。……