濒危药用植物新疆阿魏cDNA文库构建与微卫星标记*
2016-03-13王果平樊丛照罗红梅季爱加李晓瑾
王果平,樊丛照,罗红梅,季爱加,宋 骏,李晓瑾**
(1.新疆维吾尔自治区中药民族药研究所 乌鲁木齐 830002;2.中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所 北京 100193)
濒危药用植物新疆阿魏cDNA文库构建与微卫星标记*
王果平1,樊丛照1,罗红梅2,季爱加2,宋 骏1,李晓瑾1**
(1.新疆维吾尔自治区中药民族药研究所 乌鲁木齐 830002;2.中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所 北京 100193)
目的:测试和分析新疆阿魏转录组,挖掘基因表达谱多态性标记(EST-SSRs),为新疆阿魏属植物遗传多样性、生物学特性、功能基因鉴定和濒危机制的研究奠定基础。方法:提取新疆阿魏茎叶总RNA,反转录合成cDNA,应用454 GS FLX Titanium进行测序,并对其序列进行拼接,获得一致性序列(Unique Sequences);使用Simple Sequence Repeat Identification Tool(Perl Script)对一致性序列进行分析,检索SSRs模体,采用Primer 5及SSR Hunter软件设计引物并进行PCR扩增。结果:高通量测序获得新疆阿魏ESTs序列550 200条,经拼接得到60 248条Unique Sequences,从中发现1 916个EST-SSRs,平均每100 kb出现3.18个SSR,其中二核苷酸最多,GA重复最常见,随机挑选5条序列扩增及测序结果表明,80%的SSR位点与Sanger测序结果一致。结论:通过转录组测序首次获得新疆阿魏EST-SSRs,为新疆阿魏生物学特性及濒危机制研究奠定了基础。
新疆阿魏 EST-SSRs 高通量测序 分子标记
药材阿魏为伞形科阿魏属植物花茎中具有特殊气味的油胶树脂,欧亚多国皆有阿魏的药用历史。在中国,阿魏最早收载于《唐本草》(公元659年),其后历代本草均有记载,具有解痉、祛风、止泻、除肠虫、治疗哮喘、癫痫及抗流感等功效[1-12]。《中华人民共和国药典》收载新疆阿魏Ferula sinkiangensis为阿魏药材基原植物之一,仅分布于中国新疆伊犁地区。……
