汤 欢，向 丽，赵 莎，孙 伟＊＊，叶 萌

（1.四川农 业大学林学院 成都 611130；2.中国中医科学院中药研究所/中药鉴定与安全性检测评估北京市重点实验室 北京 100700；3.中国中药公司 北京 102600）

应用DNA条形码ITS2序列对市售药材黄柏的鉴定研究＊

汤 欢1，2，向 丽2，赵 莎3，孙 伟2＊＊，叶 萌1＊＊

（1.四川农 业大学林学院 成都 611130；2.中国中医科学院中药研究所/中药鉴定与安全性检测评估北京市重点实验室 北京 100700；3.中国中药公司 北京 102600）

目的：应用DNA条形码ITS2序列鉴定市售黄柏药材及其混伪品，保障药材质量及用药安全。方法：对90份药材及其基原植物样品进行DNA提取，通过聚合酶链式反应（PCR）扩增ITS2序列并进行双向测序，运用CodonCode Aligner V3.7.1对测序峰图进行校对拼接，去除低质量区和引物区，得到ITS2序列，运用MEGA 6.1对序列进行比对分析，基于K2P遗传距离构建系统聚类树。结果：90份实验样品均能提取到DNA，其DNA经PCR扩增、测序，序列拼接剪切后均能得到高质量ITS2序列。川黄柏和关黄柏基原物种黄皮树和黄檗的种内最大K2P遗传距离分别为0.018和0.004，均远小于其与混伪品的种间最小K2P遗传距离（0.051和0.056）；NJ树结果显示川黄柏和关黄柏聚为一支，其混伪品各自聚为一支。结论：基于ITS2序列的DNA条形码技术可准确、有效地鉴定市售黄柏药材及其混伪品，为其市场监管及用药安全提供了一种高效的技术方法。

DNA条形码 ITS2序列 黄柏 混伪品

黄柏Cortex phellodendri原名“蘖木”，始载于《神农本草经》，列为上品，“蘖木味苦寒。主五藏，肠胃中结热，黄疸，肠痔，止泄利，女子漏下赤白，阴阳蚀创。一名檀桓。生山谷”。在1963-2000年的历版……