徐家根，刁岩忠（1.南京大学医学院附属口腔医院药学部，南京 10008；.南京优科生物医药集团股份有限公司，南京 10009）

改进HPLC法测定注射用多种维生素（12）中维生素B12的含量

徐家根1＊，刁岩忠2（1.南京大学医学院附属口腔医院药学部，南京 210008；2.南京优科生物医药集团股份有限公司，南京 210009）

目的：改进高效液相色谱法测定注射用多种维生素（12）中维生素B12的含量。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Kromasil 100-5 C18，流动相为水（用10%稀磷酸调节pH为4.5）-乙腈（梯度洗脱），流速为1.2 ml/min，检测波长为361 nm，柱温为35Ⅱ，进样量为50 μl。结果：维生素B12检测进样量线性范围为15.03～45.09 ng（r＝0.999 9）；精密度、稳定性、重复性试验的RSD＜1%；回收率为99.31%～100.90%（RSD＝0.42%，n＝9）。结论：该方法简便、准确、灵敏度高、重复性好，可用于注射用多种维生素（12）中维生素B12的含量测定。

注射用多种维生素（12）；维生素B12；含量测定；高效液相色谱法；方法改进

维生素B12（Vitamin B12）又称氰钴胺素（Cyanocobalamin）[1]，是人体必需的水溶性维生素之一[2]，参与体内多种代谢，还可有效预防恶性贫血、老年痴呆、抑郁症等疾病，对保持人体健康起着重要作用[3]。维生素B12原料药及单方制剂标准在《中国药典》《美国药典》《欧洲药典》《日本药典》中均有收载，但均采用紫外-可见分光光度法测定含量，该方法专属性差，干扰因素多。国内外上市的注射用复合维生素制剂有注射用水溶性维生素、注射用12种复合维生素、注射用多种维生素（12）、多种维生素注射液（13）[4-5]等。这些制剂的标准均为国家药品注册标准[6-8]，尚无药典标准；国家药品注册标准及相关文献[9]中，均

1 材料

1.1 仪器

LC-20AB型HPLC仪，包括……