红黑二丸甾醇提取物通过非钙依赖磷脂酶A2介导的抗心肌细胞缺氧复氧损伤研究※

2016-02-27李玉山黄德斌

中医药通报 2016年1期

关键词：检测

● 姚勇江巍李玉山黄德斌万星▲

红黑二丸甾醇提取物通过非钙依赖磷脂酶A2介导的抗心肌细胞缺氧复氧损伤研究※

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目的：探讨红黑二丸甾醇提取物抗心肌细胞H/R损伤的作用与机制。方法：western blot检测不同H/R时间点iPLA2蛋白的表达，确定H/R的时间点；在H/R的基础上，用不同浓度梯度的红黑二丸甾醇提取物处理细胞，western blot 检测iPLA2蛋白表达，MTT法检测细胞存活率，试剂盒检测LDH、SOD、MDA、TNF-α的含量，流式细胞术检测凋亡。结果：H60min/R30min，iPLA2蛋白表达最高(P<0.01)，红黑二丸甾醇提取物量效依赖地降低了其蛋白表达，同时降低H/R时LDH、MDA、TNF-α的含量，减少凋亡，提高SOD的活性及细胞的存活率(P<0.05)。结论：红黑二丸甾醇提取物能通过iPLA2量效依赖地抗心肌细胞H/R损伤。

红黑二丸甾醇缺氧复氧非钙依赖磷脂酶A2

心肌缺血再灌注(I/R)损伤是一个复杂的多因素参与的病理过程，钙超载、氧自由基、能量代谢障碍、炎症反应等均参与了损伤过程[1，2，3]。非钙依赖磷脂酶A2(iPLA2)水解膜磷脂生成花生四烯酸(AA)和溶血磷脂(LPC)[4]。AA继而介导下游一系列的炎症反应，LPC则能够作用离子通道，如L-型钙通道、RyR2等[5]发挥效应。故本文用缺氧复氧(H/R)模拟心肌I/R时，以iPLA2为药物研究靶点。早期对I/R损伤的治疗主要针对钙超载上，单方面治疗效果不甚理想，因此需开发更为有效的药物。红黑二丸(RhizomaetHerbaBegoniaeSinensis，RHBS)是中华秋海棠植物的根茎，中华秋海棠为民间中草药，其味甘苦，具有活血止血、清热解毒的功效，常用于跌打损伤、痢疾肠炎腹痛等疾患[6]。有关此药的研究甚少，目前报道的药理功能有：改善微循环、抗炎镇痛、抑菌和降血脂[7-9]。本文选取红黑二丸甾醇提取物，探讨其抗心肌H/R损伤的作用及靶点。