马秋冉，张璐，戴青，杨星，于晓辉

(中国兽医药品监察所，北京 100081)

柱前衍生化-高效液相色谱法检测疫苗中游离甲醛含量

马秋冉，张璐，戴青，杨星，于晓辉*

(中国兽医药品监察所，北京 100081)

建立了测定疫苗中游离甲醛含量的柱前衍生化-高效液相色谱法。采用2,4-二硝基苯肼衍生疫苗中游离甲醛，乙腈︰水(65︰35)为流动相，流速为1.0 mL/min，色谱柱为Waters Atlantis T3柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，检测波长为365 nm。在此方法下，3个不同甲醛浓度样品回收率为98.28%～105.24%，相对标准偏差(RSD)为 2.3%。本方法检测限为0.4 mg/L，定量限为1.6 mg/L。游离甲醛浓度在0.0040～1.1930 mg/mL范围内，与甲醛衍生物峰面积呈良好的线性关系(r2=0.9991)。结果表明，该方法分离度高，专属性强，操作简单且不易受疫苗基质和颜色影响，可用于测定疫苗中游离甲醛含量。

高效液相色谱；柱前衍生化；甲醛；疫苗

甲醛是一种原生质毒物，对人的神经系统、肺、肝脏均有损害，对皮肤和黏膜有强烈的刺激作用，还是可疑致癌物[1]。在疫苗中常添加甲醛以达到灭活、防腐的目的[2]，《中国兽药典》对兽用疫苗游离甲醛含量有明确规定[3]。目前常采用乙酰丙酮分光光度法、亚硫酸品红比色法检测疫苗中游离甲醛含量。乙酰丙酮分光光度法在应用过程中，抗干扰性差，灵敏度稍低[4]；而亚硫酸品红比色法，在游离甲醛含量较低时对其难以进行准确测定，并且显色剂和甲醛标准溶液放置时间长短会对测定结果产生较大影响[5]。因此，本实验就建立柱前衍生化-高效液相色谱法检测疫苗中游离甲醛进行了研究，并进行了方法学验证，以期为测定疫苗中游离甲醛含量提供新方法。……