于慧，张瑞雪，王好，周井祥*，刘艳辉

(1.吉林农业大学动物科学技术学院，长春 130118;2.吉林省水产科学研究院，长春130033)

鲤I-IFN-γ作为锦鲤疱疹病毒核酸疫苗免疫佐剂的效果研究

于慧1，张瑞雪1，王好1，周井祥1*，刘艳辉2*

(1.吉林农业大学动物科学技术学院，长春 130118;2.吉林省水产科学研究院，长春130033)

为了研究鲤Ⅰ-IFN-γ的免疫效果，根据鲤Ⅰ-IFN-γ的mRNA基因序列(GenBank)，构建真核表达质粒pEGFP-N1-Ⅰ-IFN-γ，重组表达质粒与不同剂量的转染试剂EndoFectionTM Max混合后转染鲤鱼肌肉细胞，通过荧光倒置显微镜观察，重组表达质粒pEGFP-N1-Ⅰ-IFN-γ在细胞中成功表达。以多种免疫剂量的重组表达质粒与pIRES-ORF81混合对鲤鱼进行肌肉注射，每周免疫一次，共免疫三次，免疫前采血，收集血清，通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体水平。结果表明：于第三次免疫后两周，抗体水平达到最高，联合免疫与单独免疫核酸疫苗pIRES-ORF81相比，抗体水平明显升高，但差异不显著(P>0.05)。鲤Ⅰ-IFN-γ作为锦鲤疱疹病毒的免疫佐剂具有一定的免疫效果。

鲤I型γ干扰素；锦鲤疱疹病毒；核酸疫苗pIRES-ORF81；免疫效果

锦鲤疱疹病毒(Koi Herpesvirus，KHV)能够引发鲤鱼发生高致病性的锦鲤疱疹病毒病(Koi Herpesvirus Disease，KHVD)，病毒传播迅速，致死率极高。世界动物卫生组织(OIE)已经将KHVD列为必需报告的疾病[1]。目前仍然没有治疗该病的特效药物，只能通过相关免疫手段对其进行预防，接种疫苗被认为是水产病毒性疾病预防和治疗的最适当方法，单一疫苗对鱼的免疫效果并不能达到预期目标。因此，利用佐剂或免疫刺激剂来增加疫苗功效是一种新的途径。

干扰素(Interferon, IFN)是一种重要的细胞因子，可作为生化制剂类免疫佐剂，具有抗病毒功效，能在病毒感染后迅速起效[2]。细……