吴 双，马丽丽，朱善元，陆 辉*

(1.江苏农牧科技职业学院，江苏 泰州 225300； 2.甘肃农业大学 动物医学院，甘肃 兰州 730070)

鸭瘟病毒UL6基因的原核表达及多克隆抗体的制备

吴 双1，马丽丽2，朱善元1，陆 辉1*

(1.江苏农牧科技职业学院，江苏 泰州 225300； 2.甘肃农业大学 动物医学院，甘肃 兰州 730070)

为制备鼠抗鸭瘟病毒(DPV)UL6基因的多克隆抗体，采用PCR方法扩增出UL6基因，连接原核表达载体pET-32a(+)，构建表达质粒pET-UL6，并将其转化大肠杆菌BL21(DE3)，于37 ℃经1.0 mmol/L的IPTG诱导4 h，SDS-PAGE检测融合蛋白的表达情况，将目的蛋白免疫Balb/c 小鼠，利用ELISA方法检测特异性抗体效价。结果显示，构建的原核表达质粒经IPTG诱导能正确表达，且表达的重组蛋白能与DPV阳性血清反应，制备的多克隆抗体效价可达1∶16 000。表明，制备的多克隆抗体具有良好的免疫原性，可以用于UL6基因的表达检测。

鸭瘟病毒；UL6基因； 原核表达； 多克隆抗体

鸭瘟(duck plague，DP)是由鸭瘟病毒(duck plague virus，DPV)引起的养鸭业一种传染性极强、败血性、高度致死性传染病。任何品种、年龄和性别的鸭均可被感染，并且部分病愈康复鸭仍可带毒并周期性向外排毒，所以导致该病在鸭群中广泛传播，从而严重影响养鸭业的发展。此外，DPV还可感染鹅、天鹅和其他多种雁行目成员，成为世界范围内水禽养殖业危害较为严重的疫病之一[1]。

DPV是α-疱疹病毒亚科成员之一，其基因组为双股DNA，大小约为150 kb。基因组分为特定长区(UL)和特定短区(US)，UL和US连接处有内部重复序列(IR)，基因组两端含有末端重复序列(TR)[2]。DPV中UL6基因高度保守，其编码的UL6蛋白在DNA的切割和包装、形成核酸进出衣壳的通道、衣壳的成熟、对入侵病毒产生特异性免疫应答等方面发挥着重要作用[3]。……