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大鼠脊髓损伤后形态学观察和LIMK1表达的研究

2016-02-05李广贤王日光姜洪丰刘金榜牛云峰

组织工程与重建外科杂志 2016年6期

李广贤 王日光 姜洪丰 刘金榜 牛云峰

大鼠脊髓损伤后形态学观察和LIMK1表达的研究

李广贤 王日光 姜洪丰 刘金榜 牛云峰

目的通过监测大鼠脊髓损伤后其形态学和LIMK1、GFAP蛋白表达水平的动态改变,对脊髓损伤后LIMKL1是否参与胶质瘢痕的形成及调控进行初步研究。方法Wistar成年大鼠54只,随机分为3组:对照组、假伤组和SCI组,SCI组采用改良Allen's致伤装置制作大鼠脊髓损伤模型,采用BBB运动功能评分法观察大鼠后肢功能恢复情况。分别于术后1、2、3、4周取材,通过HE染色、免疫组化、免疫荧光等方法,观察伤后不同时期脊髓的病理变化及LIMK1、GFAP的表达情况。结果SCI组死亡率33%,BBB评分示SCI组术后2周后肢运动功能有明显恢复(P<0.01)。LIMK1、GFAP的免疫组化和激光共聚焦显微镜分析结果基本一致,两者蛋白水平表达均于伤后1周增高。GFAP表达于3周达峰值,4周时开始下降;LIMK1在伤后1周时出现峰值,2周开始波动下降,3周时达峰值,4周开始下降。结论大鼠脊髓损伤后,LIMK1和GFAP表达密切相关,结合LIMK1蛋白表达谱,提示LIMK1通路参与胶质瘢痕的形成和调控。

脊髓损伤LIM结构域激酶1胶质纤维酸性蛋白

脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)的修复一直是临床研究的热点和难点[1]。本研究试图寻求一种在分子水平可以调控胶质瘢痕,并促进神经再生的作用靶点,为最大可能控制及恢复脊髓神经细胞的功能提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组

成年健康Wistar大鼠54只,体质量200~220 g(佳木斯大学实验动物中心),随机分成对照组、假伤组和SCI组(按损伤时间分1、2、3、4周4个亚组)。

1.2 主要试剂与仪器

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