李晓波 李燕

冠心病(coronary heart disease，CHD)是临床上最常见的心血管疾病，发病率和病死率都很高，严重威胁人类健康。冠心病是指由于冠状动脉粥样硬化导致心肌缺血、缺氧而引起的心脏病，而脂质代谢异常与动脉粥样硬化密切相关。目前研究表明，甘油三酯、脂蛋白a、低密度脂蛋白水平升高，高密度脂蛋白水平降低，有助于动脉粥样硬化形成[1]。载脂蛋白在冠心病发生发展中的作用也日愈受到关注，陈兰等研究认为，载脂蛋白A1(Apolipoprotein A1，Apo A1)、载脂蛋白 B(Apolipoprotein B，ApoB)浓度与发展成CHD的危险性及病变程度相关[2]。本研究用聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)技术对67例冠心病和37例对照组进行ApoB基因EcoRⅠ多态性的检测，同时应用生物化学的方法检测两组的血脂水平，以探讨ApoB基因多态性与冠心病的关系及其对血脂水平的影响，以便遗传学角度了解基因变异在冠心病发生、发展中的作用，为冠心病的预防及诊治提供遗传学依据。

材料与方法

一、研究对象

所有研究对象均为2013年7月至2016年1月间收入我科的住院患者，分为冠心病组和对照组。冠心病组，均根据病史、临床表现、心电图、心肌酶谱或冠状动脉造影等明确诊断，入选对象均无肝肾疾病、严重感染、恶性肿瘤、血液病、内分泌病、结缔组织病、营养不良等疾病。

二、方法

(一)ApoB基因的检测

1.基因组DNA的提取：清晨采集空腹静脉血加入EDTA抗凝，经淋巴细胞分离液分离外周血有核细胞，用上海生物公司的UNIQ-10小量柱式基因组DNA抽提试剂盒抽提所有样本的基因组DNA。

2.引物设计

BE1：5′-TGGGAACACACAGGGCTCAC-3′

BE2：5′-CCGTCCCTACCTCCCTTATGA-3′

3.PCR扩增：扩增ApoB基因长412bp的DNA片段，包含一个EcoRⅠ多态性酶切位点，用E来表示。……