刘　炬，　杨　潇，　岳　媛，　王乐旬，　吴钟凯

(中山大学附属第一医院心外二科，广东 广州 510080)



▲并列第1作者

PI3K/AKT信号通路在SjCystatin诱导M2巨噬细胞分化过程中的影响*

刘炬▲，杨潇▲，岳媛，王乐旬，吴钟凯△

(中山大学附属第一医院心外二科，广东 广州 510080)

[摘要]目的： 进一步确定日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(SjCystatin)诱导M2巨噬细胞分化的亚型及相关机制。方法: 用ELISA、RT-qPCR或Western blot法测定IL-10、IL-12、巨噬细胞亚型表面标志物LIGHT(M2b)及Arg-1(M2a+M2c)的表达；用Western blot法测定AKT的磷酸化水平。结果: SjCystatin处理组在6 h、12 h和24 h时IL-10表达量持续增加；处理12 h， LIGHT的mRNA和蛋白表达量增加但Arg-1的mRNA和蛋白表达量降低；AKT磷酸化水平增加。PI3K/AKT抑制剂处理组IL-10的释放量在12 h和24 h持续降低；24 h， LIGHT的mRNA和蛋白表达量降低但Arg-1的mRNA和蛋白表达量增加；AKT的磷酸化水平减少。结论: SjCystatin 促进了活化的M2巨噬细胞分化为M2b亚型巨噬细胞，并且PI3K/AKT信号通路参与了这一过程。

[关键词]半胱氨酸蛋白酶抑制剂； M2b巨噬细胞； M2巨噬细胞； PI3K/AKT信号通路

巨噬细胞极化(macrophage polarization)/分化是单核巨噬细胞系统的重要特点，根据其分化后诱导免疫反应的类型不同，可将分化后的巨噬细胞分为M1和M2型巨噬细胞[1]。M2型巨噬细胞又可根据其表面分子标志物和功能进一步分为M2a、M2b和M2c[2]3种，它们在炎症调控过程中发挥着重要的作用。

众所周知，寄生虫体内的半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatin)是一种重要的免疫调节分子，巨噬细胞是它们众多靶向细胞中的一员[3]。研究表明cystatin具有良好的抗炎作用[4]。本实验中所应用的cystatin蛋白——SjCystatin为通过体外重组表达的日本血吸虫(Schistosomajaponicum)体内的免疫调节分子[5]。

已有研究表明cystatin对巨噬细胞有诱导分化作用，并且经cystatin诱导分化产生的巨噬细胞是M2型巨噬细胞，后者产生了大量的IL-10，可有效缓解急性炎症的反应程度[4]。……