脊髓背角P2X4、P2Y12和P2Y13受体参与AM1241对CCI大鼠的镇痛效应

田虹1，黄婷婷2，刘正律2，陈远寿1，刘晓红1，曾俊伟1

(1.遵义医学院 基础医学院生理学教研室, 贵州 遵义563099；2.贵州省麻醉与器官功能保护重点实验室,贵州 遵义563099)

[摘要]目的 观察鞘内注射大麻素CB2受体激动剂AM1241对慢性坐骨神经结扎(CCI)大鼠机械痛阈、脊髓背角P2X4、P2Y12和P2Y13受体表达变化的影响。方法 健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠40只随机分为5组(n=8): 假手术组、CCI组(坐骨神经结扎+ 鞘内注射0.005%DMSO生理盐水)、1 pmol/LAM1241处理组(坐骨神经结扎+鞘内注射AM1241 1 pmol/L)、10 pmol/LAM1241处理组(坐骨神经结扎+鞘内注射AM1241 10 pmol/L)、100 pmol/LAM1241处理组(坐骨神经结扎+鞘内注射AM1241 100 pmol/L)。CCI组及不同浓度AM1241处理组大鼠均于鞘内置管7 d之后行坐骨神经结扎，连续14 d 鞘内注射，每天2次；分别在术前1 d，术后第1、3、5、7、10、14天注射1 h后测定机械痛阈(MWT)，分别在术后第7，14天免疫印迹法(western blot)观察脊髓背角P2X4、P2Y12和P2Y13受体表达变化。结果 ①CCI组术后第1、3、5、7、10、14天MWT显著低于假手术组(P<0.05)，10 pmol/L AM1241和100 pmol/L AM1241 处理组术后第1、3、5、7天MWT明显高于CCI组(P<0.01)；但10 pmol/L AM1241处理组术后第10、14天MWT与CCI组相比无明显差异(P>0.05)；100 pmol/L AM1241 处理组术后第10、14天MWT仍高于CCI组(P<0.05)；②与假手术组相比，CCI组术后第7、14天脊髓背角P2X4、P2Y12和P2Y13受体表达显著上调(P<0.01)；与CCI组相比，100 mol/L AM1241处理组在术后第7天抑制脊髓背角P2Y12和P2Y13受体表达(P<0.05)，在术后第14天抑制背角P2X4受体表达(P<0.05)。结论 大麻素CB2受体激动剂AM1241的镇痛效应可能与抑制脊髓背角小胶质细胞P2X4、P2Y12和P2Y13受体表达有关。

[关键词]神经病理性疼痛；CB2受体；小胶质细胞

近年研究表明，大麻素CB2(Cannabinoid receptor 2)受体属于视紫红质G蛋白耦联受体家族，高选择性表达在脊髓背角小胶质细胞，参与了大麻类物质的镇痛效应[1-2]。CB2受体可能和许多G蛋白以及体内其他的效应系统耦联，从而参与调节实验动物足底注射致炎物质造成的炎性痛和外周神经神经损伤造成的病理性疼痛。在脊髓背角小胶质细胞还存在P2X4、P2Y12和P2Y13等多种嘌呤受体，有研究提示，鞘内分别注射P2X4受体反义核酸、P2Y12受体拮抗剂、P2Y13受体拮抗剂均可以减轻坐骨神经分支选择性损伤模型大鼠的热痛敏和机械痛敏[3]。……