杜江涛，戴方伟，周莎桑，宋晓明，吕　宇，萨晓婴

(1 浙江省医学科学院实验动物中心, 杭州　310013;2 杭州师范大学实验动物中心, 杭州　310036)



鼠痘病毒荧光定量Taqman-PCR检测方法的建立与应用

杜江涛1，戴方伟1，周莎桑1，宋晓明2，吕宇1，萨晓婴1

(1 浙江省医学科学院实验动物中心, 杭州310013;2 杭州师范大学实验动物中心, 杭州310036)

【摘要】目的建立鼠痘病毒的荧光定量Taqman-PCR检测方法，以期能快速、准确、灵敏、特异的检出鼠痘病毒。方法经过比对和筛选，本研究选取鼠痘病毒的ERPV027基因480-800位序列段，作为引物设计位点设计引物和探针，并对该引物对和探针的特异性、灵敏性、稳定性和重复性进行检测。结果本研究建立的方法，对鼠痘病毒的检测极限是68 copies/μL；该方法特异性强，只对鼠痘病毒特定片段进行特异性扩增，而对小鼠肝炎病毒、仙台病毒、沙门氏菌等其它病毒、细菌无扩增；该方法稳定性和重复性均较好。结论本研究成功建立了检测鼠痘病毒的荧光定量Taqman-PCR方法，该方法特异性强、灵敏度高，且具有较好的稳定性和重复性，具有广阔的应用价值。

【关键词】鼠痘病毒；荧光定量PCR；Taqman探针

鼠痘(mouse pox)是由鼠痘病毒(mouse poxvirus，MPV)感染引起的实验小鼠的一种烈性传染病。本病多呈爆发性流行，致死率较高，常造成全群淘汰，危害极大[1]。临床表现以四肢、尾和头部肿胀、溃烂、坏死甚至脚趾脱落为特征，故又称脱脚病(Ectromelia，Ect)[2]。

目前，鼠痘病毒的检测方法主要是酶联免疫吸附技术(ELISA)和免疫荧光技术(IFA)[3]等血清学方法。传统的血清学方法对检测鼠痘病毒感染，特别是隐性感染存在较大的局限性。……