卢海龙，杨荣礼，李雷(徐州医学院附属医院，江苏徐州221006)

体外高糖环境对H9C2心肌细胞增殖的影响及其机制探讨

卢海龙，杨荣礼，李雷
(徐州医学院附属医院，江苏徐州221006)

摘要:目的观察体外高糖环境对H9C2心肌细胞增殖的影响，并探讨其作用机制。方法将体外培养鼠胚心肌细胞H9C2随机分为四组，1组培养液中加入终浓度为5.5 mmol/L的D-葡萄糖，2组加入终浓度为27.5 mmol/L的甘露醇和5.5 mmol/L的D-葡萄糖，3组加入终浓度为33 mmol/L的D-葡萄糖，4组加入终浓度为2 μmol/L的经典瞬时受体蛋白( TRPC)阻滞剂SKF96365和终浓度为33 mmol/L的D-葡萄糖。分别在培养24、48、72 h时，采用CCK8法测定细胞增殖率，实时定量PCR法测定经典瞬时受体蛋白6( TRPC6)、活化T细胞核因子3( NFAT3) mRNA; 72 h时采用Western blotting法检测TRPC6及NFAT3蛋白。结果培养72 h时1、2、3、4组细胞增殖率分别为105.88%±10.01%、98.67%±8.97%、28.55%±6.32%、49.18%±7.14%，3组较1、2组降低( P均＜0.05)，4组较3组增高( P＜0.05) ; 3组TRPC6、NFAT3 mRNA及蛋白相对表达量较1、2组增加( P均＜0.05)，4组较3组下降( P均＜0.05)。结论高糖抑制心肌细胞增殖;促进心肌细胞TRPC6表达，导致TRPC通道开放，启动钙调神经素( CaN)/活化T细胞核因子( NFAT)通路，可能是其作用机制。

关键词:糖尿病心肌病;高糖;鼠胚心肌细胞株H9C2;经典瞬时受体蛋白6;活化T细胞核因子3

糖尿病心肌病( DCM)早期表现为舒张性左心功能不全，晚期容易并发恶性心律失常、心力衰竭、甚至猝死［1，2］。迄今为止，DCM发病机制仍不完全明确，治疗未有实质性突破［3］。研究发现，心肌细胞内钙超载与DCM的发生有关［4］。高血糖是糖尿病患者的主要特征之一，能够直接损伤心肌细胞，引起心肌病变［5］。但是，高血糖对心肌细胞内钙超载是否有促进作用及其可能机制，文献报道较少。……