徐苗苗 李 健 李桂玲 苏国成 陈吉刚 刘静雯①

(1. 集美大学食品与生物工程学院 厦门 361021; 2. 福建省高校食品微生物与酶工程重点实验室 厦门 361021;3. 浙江万里学院生物与环境学院 宁波 315100)

副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)隶属弧菌科的弧菌属。是一种嗜盐性海洋人鱼共患致病菌,于1950年由日本的藤原恒三郎教授从引起食物中毒的小沙丁鱼中初次分离得到(藤野恒三郎, 1951)。该菌广泛分布于世界各地的近岸海水、海底沉积物、海产品及腌制食品中(Su et al, 2007)。副溶血性弧菌食物中毒与进食含有该菌的食物有关, 生食或食入未煮熟的受到污染的海产品或腌制食品是其主要传播途径(Chiou et al, 2000; McLaughlin et al, 2005;Hara-Kudo et al, 2012; Nelapati et al, 2012; Newton et al, 2012)。近年来由副溶血性弧菌引起的食源性食物中毒的比例高达68.0%, 居我国沿海地区细菌性食物中毒之首(毛雪丹等, 2013)。全球食源性腹泻疾病中有 50%—70%是由副溶血性弧菌引起(Wang et al,2013; Xu et al, 2014)。因此, 选择合适的检测靶点, 建立快速简便的检测方法是预防副溶血性弧菌食物中毒最有效的途径之一。

目前用于检测副溶血性弧菌的技术包括传统PCR法、荧光定量PCR法、多重PCR法、酶联免疫吸附法、免疫胶体金、核酸探针技术、基因芯片技术、变性高效液相色谱技术及DNA指纹图谱等(Parida et al, 2005; Ward et al, 2006; Bisha et al, 2012; Ceccarelli et al, 2013)。这些方法因所需设备昂贵、耗时, 技术水平要求较高等弊端, 实用性受到限制(徐苗苗等,2014)。近年发展起来的环介导恒温扩增技术已被广泛应用于病原微生物的快速检测(Prompamorn et al,2011; Xu et al, 2012), 该方法在恒温条件下就能发生反应, 对设备的要求比较低, 操作简单, 反应只需60min, 较传统的 PCR技术具有高效、快速等优点,因此在某种程度上很好地解决了目前基因检测的弊端。……