赵沙沙　田永宏　余华强　孙永建　曹国长　陈波　房振兵　范兵

摘要：介绍了稻瘟病菌[Magnaporthe grisea（Hebert）Barr]孢子的分离和保存方法，并加以比较和分析。结果表明，将发病组织进行保湿培养，产孢后用洗耳球将孢子吹到培养基上挑取单一菌落，采用滤纸片法保存，可以很好地分离和保存稻瘟病菌单孢。

关键词：稻瘟病菌[Magnaporthe grisea（Hebert）Barr]； 单孢； 分离； 保存

中图分类号：S432.4+4 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）24-6252-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.24.040

Abstract： The methods of isolation and preservation of single spore of rice blast fungus were introduced， which were taken into comparison and analysis. The results showed that the diseased tissues were cultured by moisture-retaining， then the spores produced were blown into the plate culture medium to pick a single colony with ear washing bulb and preservated by filter paper method， which could isolate and preservate the single spore of rice blast fungus commendably.

Key words： rice blast fungus[Magnaporthe grisea（Hebert）Barr]； single spore； isolation； preservation

由稻瘟病菌[Magnaporthe grisea（Hebert）Barr]引起的稻瘟病是世界上水稻三大病害之一，给水稻的产量和质量造成了严重的影响。长期的生产实践证明，选育和种植抗稻瘟病品种是防治稻瘟病最经济、有效和安全的措施，符合人类对绿色食物的要求[1]。选育抗稻瘟病品种需要在田间对待选材料苗期、分蘖盛期和孕穗初期进行人工接种鉴定，选择出抗病且大田表现较好的水稻材料，其中关键的一个环节就是获取足够量的接种体——稻瘟病菌分生孢子。这就需要从发病的水稻标样上分离得到不同稻瘟病菌株的单孢并加以保存。本研究介绍了稻瘟病菌孢子的一些分离和保存方法，并加以比较和分析，为育种工作者分离和保存稻瘟病菌孢子并进行接种鉴定提供参考。

1 稻瘟病菌孢子的分离方法

1.1 手工直接挑取孢子的单孢分离法

张君成[2]的单孢分离法是用手工直接挑取孢子，所需材料设备比较简单，但操作难度大，技巧性强。首先在酒精灯上将接种针针尖烧红，然后用镊子将针尖弯曲1 cm左右，制成所需要的接种针。用无菌刀片将清水琼脂（WA）平板切成2 cm×1 cm的琼脂块，挑取一块置于无菌的载玻片上，制成挑孢琼脂块。……