·论著·

基于植物生长调节剂萘乙酸和6-苄氨基嘌呤组合的红花组织培养体系的优化

薛英茹，李东巧，高越，郭美丽*(第二军医大学药学院生药学教研室,上海 200433)

[摘要]目的：建立高效的红花(Carthmus tinctorius L.)离体组织培养体系，为红花的基因操作搭建平台。方法：以萌发6～8 d的红花无菌苗子叶为外植体，选用MS基础培养基，应用萘乙酸(1-naphthylacetic acid,NAA)+6-苄氨基嘌呤(6-benzyl amino purine,6-BA)+激动素(kinetin,KT)为组织培养的植物生长调节剂，优化红花的组织培养体系。结果：红花组织培养的最佳植物生长调节剂配方为：NAA 2.0 mg/L+6-BA 4.0 mg/L+KT 20.0 mg/L，添加活性炭(4 g/L)或硝酸银(5 mg/L)，光照时间为16 h/d，光照强度9000 lx，培养温度为(25±2) ℃，平均愈伤组织发生率高达86.4%，而且再生芽生长稳定，重现性高。结论：本研究优化建立了红花的不定芽再生体系，为红花基因操作平台的建立奠定了基础。

[关键词]红花；组织培养；萘乙酸；6-苄氨基嘌呤；激动素

[中图分类号]R931.2[文献标志码]A

DOI：10.5428/pcar20150203

基金项目国家自然科学基金(81173484,81473300)，上海市自然科学基金(13ZR1448200)

作者简介薛英茹(女)，硕士生.

[收稿日期]2014-12-09

Optimization ofCarthamustinctoriusL. tissue culture system based on the combination of 1-naphthylacetic acid and 6-benzyl amino purine

XUE YingRu，LI DongQiao，GAO Yue，GUO MeiLi*(Department of Pharmacognosy，School of Pharmacy，Second Military Medical University，Shanghai 200433，China)

ABSTRACT[]Objective：To establish the regeneration system of safflower (Carthamus tinctorius L.),so as to create a platform of gene manipulation of safflower.Methods：Through tissue culture experiments，cotyledons germinated 6-8 days of safflower were selected as explants and cultured with Murashige and Skoog(MS) as the basal medium at (25±2) ℃ temperature with 16 h/d illumination and 9000 lx light intensity. Results：The optimum callus medium of safflower was MS basal medium supplemented with 1-naphthylacetic acid(NAA) 2.0 mg/L+6-benzyl amino purine(6-BA) 4.0 mg/L+kinetin (KT) 20.0 mg/L and addition of acticarbon(4 g/L) or silver nitrate(5 mg/L)，which made the callus mean rate as high as 86.4% and with higher regeneration bud grow stability and reproducibility. Conclusion：The research optimized adventitious shoot regeneration system and established the foundation for safflower gene manipulation platform.

[KEY WORDS]CarthamustinctoriusL.;tissue culture;1-naphthylacetic acid;6-benzyl amino purine;kinetin

[Pharm Care Res，2015，15(2)：91-94]

E-mail：xueyingru469376081@126.com;

李东巧(女)，硕士生.

E-mail：butterfly_qiao@163.com；两人为共同第一作者

*通信作者(Corresponding author)：郭美丽，E-mail：mlguo@126.com

红花(CarthamustinctoriusL.)是菊科一年或两年生草本植物，红花花冠是传统的活血化瘀中药，具有扩张冠状动脉、抗凝、降血压、耐缺氧、防治血栓、抗炎镇痛等多种药理作用，临床应用广泛[1,2]。建立高效的红花离体组织培养再生体系，对于红花的基因改造具有极其重要的意义。国内外有关红花的组织培养工作一直有断断续续的报道，但由于红花含有大量黄酮类成分，容易褐化，不同产地、不同红花品种再生所需要的诱导条件不同，以及红花自身的特性等，导致其再生芽生长非常困难[3,4]。……