柞蚕免疫活性蛋白对肉仔鸡生长性能和免疫功能的影响

2016-01-09李亚洁王林美马淑慧李学军孙永欣李树英

饲料工业 2016年19期

■李亚洁王林美米锐马淑慧李学军孙永欣孟楠李树英

(辽宁省农业科学院大连生物技术研究所，辽宁大连 116024)

饲料中长期使用抗生素会造成畜禽免疫功能下降,抗生素还可在畜禽体内残留,给畜禽健康养殖和食品安全带来危害，进而危及人类的健康。因此，饲料工业中急需无毒、无害的添加剂[1-8]。利用柞蚕肠道中的链球菌（1212）作为诱导源诱导柞蚕蛹产生的一类具有抗菌活性的物质，经测定其主要成分有抗菌肽、溶菌酶和凝集素等，已有研究证实这些活性物质尤其是抗菌肽具有较强的杀菌能力，能够杀死多种细菌、真菌、原虫、病毒和肿瘤细胞[9-11]。柞蚕蛹又包含所有必需的氨基酸，被认为是含高质量蛋白质的食物，畜禽食用后易被体内蛋白酶水解消化而无毒副作用[12-13]。本试验将经1212菌株诱导的柞蚕蛹精制成柞蚕免疫活性蛋白添加到日粮中，研究其对肉仔鸡生长性能及血液免疫指标的影响，为柞蚕免疫活性蛋白的进一步推广应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

饲料用柞蚕免疫活性蛋白由本实验室自行制备。

1.2 试验动物与试验设计

试验采用完全随机试验设计,将1日龄健康的（AA）肉仔鸡200只,随机分为5组,每个处理5个重复,每个重复8只鸡,对照组饲喂基础日粮，抗生素组为基础日粮中添加抗生素(左氧氟沙星)0.05%，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别为基础日粮中添加柞蚕免疫活性蛋白1%、5%、10%，试验期为28 d。基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平(风干基础)

1.3 饲养管理

试验期内保持24 h/d恒定光照和机械通风制度，在前3 d内舍温保持33℃，之后每周降低3℃，直到24℃时保持恒定不变。试验期内自由采食和饮水，每天人工清粪1次。疫苗接种按AA肉仔鸡免疫程序进行。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 生长性能

试验鸡进鸡舍时，称取其初始体重，在28日龄空腹称量各重复鸡体重和饲料消耗量，详细记录各组给料量和剩余料量，记录鸡只死亡数量，并计算1～28日龄试验鸡平均采食量、平均料重比及平均日增重。

1.4.2 免疫器官指数

在28日龄，每重复随机抽取1只体重相近的鸡，屠宰后分别采摘脾脏、胸腺、法氏囊，并剔除附着的组织用滤纸吸干血水后称鲜重，计算其免疫器官指数。计算公式为:

免疫器官指数(%)=（免疫器官鲜重/宰前空腹活重)×100。

1.4.3 血清中免疫球蛋白含量

于试验期第28 d，每重复选取1只体重相近的鸡，翅静脉采血3 000 r/min离心15 min，分装血清，于-20℃保存备用,用于测定血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)和免疫球蛋白M(IgM)的含量以及补体3(C3)和补体4(C4)含量，所有免疫指标采用酶联免疫分析法(江苏晶美生物科技有限公司鸡专用试剂盒)测定。

1.5 统计分析

采用SPSS17.0软件对试验结果进行统计分析，以P＜0.05作为差异显著性判断标准。

2 结果与分析

2.1 柞蚕免疫活性蛋白对肉仔鸡生长性能的影响

肉仔鸡日粮中添加3个水平（1%、5%、10%）柞蚕免疫活性蛋白对肉仔鸡生长性能的影响见表2，从表2可以看出,在平均日增重方面：试验各组与抗生素组之间无显著差异（P＞0.05)，但4组均显著高于对照组（P＜0.05)，其中试验Ⅱ组最好，与对照组相比增幅达到41.15%；在采食量方面：试验Ⅰ组、Ⅱ组、抗生素组与对照组相比有增加的趋势，但差异不显著（P＞0.05)，试验Ⅲ组却显著低于抗生素组（P＜0.05)，而与对照组相比差异不显著（P＞0.05)；在料重比方面：试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组均显著低于对照组（P＜0.05)，分别降低了14.67%、25.23%和23.85%，且试验Ⅱ组和Ⅲ组均显著低于抗生素组（P＜0.05)。

表2 柞蚕免疫活性蛋白对鸡生长性能的影响

2.2 柞蚕免疫活性蛋白对肉鸡仔免疫器官指数的影响

由表3可见,对脾脏指数的影响，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组与抗生素组之间无显著差异（P＞0.05)，但4组均显著高于对照组（P＜0.05)，其中试验Ⅱ组脾脏指数最高，与对照组相比，高出31.57%；对胸腺指数的影响，试验Ⅱ、Ⅲ组均显著高于抗生素和对照组（P＜0.05)，试验Ⅰ组与抗生素组、对照组之间无显著差异（P＞0.05)；对于法氏囊指数，试验各组均显著高于对照组（P＜0.05)，试验Ⅱ、Ⅲ组又显著高于抗生素组（P＜0.05)，试验Ⅰ组与抗生素组之间无显著差异（P＞0.05)。

表3 柞蚕免疫活性蛋白对28日龄肉仔鸡免疫器官指数的影响

2.3 柞蚕免疫活性蛋白对鸡血清免疫球蛋白含量、补体C3和C4的含量的影响(见表4)

由表4可见，与对照组相比，试验Ⅱ、Ⅲ组和抗生素组的鸡血清中IgG的含量分别提高了36.01%、30.03%和12.95%（P＜0.05)，IgM的含量分别提高了22.74%、20.64%和8.33%（P＜0.05)，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的血清中IgA的含量分别提高了25.58%、33.78%和13.46%（P＜0.05)；就补体C3的含量而言，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组较对照组和抗生素组均有显著增加（P＜0.05)，其中试验Ⅱ组增加最多，与对照组相比，增幅达到33.94%，除了试验Ⅰ组以外，其余各组补体C4的含量均显著高于对照组（P＜0.05)，试验Ⅱ、Ⅲ组又均显著高于抗生素组（P＜0.05)。

3 讨论

本课题组研制的柞蚕免疫活性蛋白是以柞蚕蛹为原料,诱导条件下激活柞蚕的免疫防御系统,产生一系列抗病活性物质,其中,主要包括抗菌肽、溶菌酶和凝集素等多种活性多肽,同时它又是一种优质理想的营养蛋白源，经分析测定，蛋白质含量为54.6%、粗脂肪为21.2%，含有18种氨基酸、8种必需氨基酸，其中必需氨基酸为43.06 g/100 g，占氨基酸总量的47.32%[14]。本试验研究结果显示，饲粮中添加不同水平柞蚕免疫活性蛋白可显著提高肉仔鸡平均日增重，显著降低料重比（P＜0.05)，其中，尤以添加5%效果最好，与对照组相比，平均日增质量提高了41.15%，料重比降低了25.23%，在日采食量方面，与对照组相比，添加1%、5%和抗生素组均有增加趋势（P＞0.05)，但添加10%时，平均日采食量低于其他各组，与抗生素组相比达到了显著水平（P＜0.05)，综上表明，饲粮中适量添加柞蚕免疫活性蛋白可在不同程度上提高肉仔鸡生长性能，这与姚远等[15]、刘钟渊等[16]研究结果类似。

表4 柞蚕免疫活性蛋白鸡血清免疫球蛋白及C3和C4的含量的影响

包汇慧等[17]研究报道，抗菌肽能降低热应激对肉鸡免疫器官的损伤及肝HSP70表达，并对免疫器官指数有不同程度的调节和促进作用，姚远等[15]在日粮中添加天蚕素(500 mg/kg)后，鸡血清IgA、IgG、IgM含量均显著升高，添加天蚕素(200～500 mg/kg)可显著增加血清C4含量，王静[18]在日粮中适量添加抗菌肽可以促进鸡血清免疫球蛋白和补体C3含量的增加。李亚洁等[19]之前的研究结果发现，在断奶仔猪的饲粮中添加柞蚕免疫活性蛋白，不仅能提高仔猪免疫器官指数，还能显著增加仔猪血清中IgA和IgG含量。本研究与以上学者研究体现出一致结果,饲粮中添加不同水平柞蚕免疫活性蛋白均显著提高鸡的脾脏指数、法氏囊指数及鸡血清中免疫球蛋白IgA、补体C3的含量，添加5%和10%还显著提高胸腺指数和补体C4的含量，说明柞蚕免疫活性蛋白具有促进和调节机体免疫器官的发育，增强肉仔鸡免疫功能的作用。