张寅生

普利生凝血试剂在Sysmex CA-530全自动血凝仪上的应用评价

张寅生

目的：比对国产普利生凝血试剂与原装进口Siemens试剂在日本Sysmex CA-530全自动血凝仪上使用结果有无显著差异。方法：分别用普利生凝血酶时间（prothrombin time，PT）和活化部分凝血活酶时间（actived partial thromboplastin time，APTT）测定试剂与原装Siemens试剂检测临床标本，统计结果后进行分析。结果：国产普利生PT和APTT测定试剂与原装Siemens试剂检测结果无显著差异，PT、国际化标准比率（international normalized，INR）与APTT值偏差均符合美国CLIA＇88标准要求。结论：国产普利生PT和APTT测定试剂与原装试剂相关性良好，可以替代Siemens试剂在Sysmex CA-530全自动血凝仪上使用。

凝血试剂；全自动血凝仪；应用

0 引言

Sysmex CA-530全自动血凝仪经济实用，可同时开展多项凝血检测，是中小型实验室开展血栓与止血实验的适合机型[1]。原装进口Siemens试剂价格较昂贵，而国产血凝商品化试剂盒价格相对低廉。但按照美国国家临床实验室EP9文件的要求，非配套试剂需与配套试剂的测定结果进行比对分析，验证其有效性[2]。本组在Sysmex CA-530全自动血凝仪上使用国产普利生凝血试剂与原装进口Siemens试剂对同批的血浆样本进行检测，对结果进行分析研究。

1 检测材料及方法

1.1 仪器与试剂

仪器：日本Sysmex CA-530全自动血凝仪；试剂：国产普利生凝血酶原时间（prothrombin time，PT）和活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）凝血测定试剂与原装进口Siemens试剂。

1.2 质量控制

在仪器运转正常的情况下，分别对每种试剂进行室内高、中、低值质控测定，质控良好后进行检测。

1.3 检测方法

要求采血者严格按照操作规范抽取临床患者标本[3]（为防止样本水平过于集中，注意收集包括术前正常体检、口服抗凝药、住院输注肝素、血栓前高凝状态等多水平人群标本），真空采血管准确1∶9抗凝，充分混匀，即刻3 000 r/min离心10 min后分离血浆。选择合格标本，每日上午及下午各检测10例。上午10例进行PT比对检测，下午10例进行APTT比对检测，每种试剂均测定2次，试剂按ABBA顺序更换，次日按BAAB顺序更换，记录结果，取平均值。在室温下标本放置时间过长会导致凝血因子不稳定，故要求所有比对测定在2 h内完成[4]。在每种试剂进行比对测定过程中同样进行室内质控测定，以保证即时结果的可靠性。

1.4 统计学处理

应用SPSS13.0统计学软件对数据进行统计分析。以进口原装Siemens试剂检测结果为x轴，以国产普利生PT凝血测定试剂为y轴，以均值（x）、偏差（BT%）、标准差（s）、相关系数（r）、回归方程（y=bx+a）表示。参考美国CLIA′88的要求，绘制回归曲线，计算偏差，验证国产普利生血凝试剂结果在Sysmex血凝仪上使用是否符合相关要求[5]。

2 结果比对分析

2.1 国产试剂在Sysmex CA-530血凝仪上的比对

用国产普利生凝血试剂与原装进口Siemens试剂分别测定临床标本，数据见表1、2。

表1 国产普利生凝血试剂在Sysmex血凝仪上的比对

表2 国产凝血试剂与原装试剂验证分析

由表1可以看出，与原装试剂相比，国产试剂相关系数分别为：（1）PT试剂：r=0.962，y=1.111x-0.987；（2）国际化标准比率（international normalized ratio，INR）：r=0.964，y=1.042x-0.061；（3）APTT试剂：r=0.972，y=1.090x-1.045。检测结果具有良好的相关性。

2.2 国产凝血试剂与原装试剂验证分析

由表2可看出，使用Sysmex CA-530血凝仪进行检测，通过低、高、均值线性回归计算y值，国产普利生试剂的检测结果与原装Siemens试剂相比，PT检测结果低值、高值及均值的偏差（BT）分别为1.05%、8.07%和3.28%；INR结果低值、高值及均值的偏差（BT）分别为-2.30%、2.14%和-0.90%；APTT检测结果低值、高值及均值的偏差（BT）分别为2.89%、7.67%和5.38%。在全部高值、低值及均值的偏差中，最大偏差为7.67%，实际偏差最大为PT高值（14.60%），均在±15%范围内，未超出美国CLIA′88能力对比检验的要求。

3 讨论

（1）从表1、2可得出，与原装Siemens试剂相比，国产普利生试剂PT、INR及APTT检测相关性较好，偏差均在±15%范围内，符合美国CLIA′88能力对比分析检验的质量要求。

（2）从表1可看出，相对原装试剂而言，国产试剂标准差均偏大，离散程度较高，因此应注意高值及低值结果的检测。建议实验室在使用国产试剂的同时应有进口试剂备份，以对异常结果进行监测。

（3）从表2可看出，在PT高值时实际偏差较大，达14.60%，但同样的标本INR偏差为6.79%，偏差趋小。这是因为不同厂家试剂的正常均值各不相同，且国际敏感指数（international sensitivity index，ISI）值也存在明显差异。对PT的比对要综合分析，有人提出区域性ISI值的概念[6]。本文建议：①对于正常范围内的结果，PT及INR无明显差异，可选任一项进行报告，对于高值患者应取用INR值[7]。②尽量使用ISI值接近1的试剂。本文在使用国产普利生试剂中发现ISI差距较大（0.94～1.14），国产厂家应注意此问题。

（4）原装试剂与国产试剂均需注意规范使用。因为Sysmex CA-530血凝仪多在中小实验室应用，标本量小且送检不集中。本实验室在做比对实验及日常工作中均发现因试剂问题导致质控失控的情况。因此，本文建议：①每天早上根据经验估算临床标本量添加试剂，试剂循环使用最多不超过1 d。②在没有标本的情况下将试剂盘放入2～8℃冰箱封盖保存，使用前复温20 min。③试剂不能循环添加。尤其注意APTT检测中的CaCl2，理论上非常稳定，很多实验室忽视对CaCl2的使用，导致CaCl2失活，APTT结果批量延长。④注意跟随标准化质控血清。

（5）Sysmex CA-530血凝仪凝固法基于光学检测法，经检测，发现因纤维蛋白原变为纤维蛋白导致混合物的浊度增加，从而引起散射光浊度的变化。在测定中应做到：①重视仪器的维护与保养；②专人负责仪器的使用与管理；③重视仪器报警，及时查找原因；④注意标本因素对检测的干扰影响，加强对采血者检测者的培训；⑤作为临床实验室检测者，应通晓凝血理论基础，对于异常结果具体分析[8]；⑥出现危急值及时与临床沟通，与临床不符时需对仪器、试剂、样本进行全面检查分析，报告危急值需做到审慎、准确、及时。

4 结语

PT和APTT作为凝血检测最重要的检测项目，前者是筛检外源性凝血系统的唯一试验，后者是筛检内源性凝血的系统试验，其结果的可靠和稳定性对临床尤为重要[9]。如何保证凝血结果的准确性、减少误差，成为检验工作者需重视的课题。通过本文的

（►►►►）（◄◄◄◄）比对分析，可得出：国产普利生PT和APTT凝血试剂与原装试剂相比具有良好的相关性，且价格相对低廉，偏差在允许范围内，因此中小实验室在做好室内质控和室间质评的情况下可使用国产试剂代替原装试剂进行检测。

[1]刘晓峰，叶定儿.SysmexCA-530全自动血凝仪的应用体会[J].江西医学检验，2002，20（6）：407，393.

[2]邱春红，张原琪，李德干.载脂蛋白B检测试剂比对研究[J].国际检验医学杂志，2010，31（7）：760-761.

[3]赵建宏，戴二黑.医学检验标本留取指南[M].北京：中国科学技术出版社，2007：68-70.

[4]郭光辉，束振华.影响凝血四项测定结果的分析前因素[J].海南医学，2010，21（24）：108-109.

[5]林云，施雄飞.国产液体试剂在Stago血凝仪上的性能评价[J].临床和实验医学杂志，2010，9（22）：1 716-1 717.

[6]王学锋，王鸿利.血栓与止血的检测及应用[M].上海：世界图书出版公司，2002：105.

[7]丛玉隆.关于卫生部出凝血时间操作规程《通知》的理解[J].中华检验医学杂志，2001，24（3）：183-185.

[8]许文荣，王建中.临床血液学与检验[M].4版.北京：人民卫生出版社，2009：407-408.

[9]熊立凡，刘成玉.临床检验基础[M].4版.北京：人民卫生出版社，2010：70-71.

（收稿：2014-03-10 修回：2014-07-20）

（栏目责任编校：李 影）

Application evaluation of domestic Precil coagulation reagent in Japan Sysmex coagulometer

ZHANG Yin-sheng
(Department of Clinical Laboratory,Xinglong County People's Hospital,Xinglong 067300,Hebei Province,China)

ObjectiveTo investigate the difference between domestic Precil coagulation reagent and imported reagent Siemens used in Japan SysmexCA-530 automated coagulometer.MethodsThe clinical specimens were tested for prothrombin time(PT)and activated partial thromboplastin time(APTT)with Precil reagents and Siemens reagents respectively, and then the results were analyzed statistically.ResultsThere were no significant differences between the results of PT and APTT by Precil and Siemens reagents,and Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 (CLIA'88)was met in biases of PT,international normalized ratio (INR)and APTT.ConclusionThere is high correlation between Precil PT and APTT reagents and the original ones,which can replace Siemens reagents for Sysmex Coagulometer.[Chinese Medical Equipment Journal，2015，36（3）：105-106，135]

coagulation reagent;fully automatic blood coagulation analyzer;application

R318.6；TH776

A

1003-8868（2015）03-0105-03

10.7687/J.ISSN1003-8868.2015.03.105

张寅生（1977—），女，副主任检验师，主要从事临床检验方面的研究工作。

067300河北兴隆，兴隆县人民医院检验科（张寅生）