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碱性成纤维细胞生长因子-壳聚糖载体诱导神经干细胞向神经元分化并形成突触的研究①

2015-12-13王聪杨朝阳段红梅李晓光

中国康复理论与实践 2015年4期
关键词:壳聚糖

王聪,杨朝阳,段红梅,李晓光

碱性成纤维细胞生长因子-壳聚糖载体诱导神经干细胞向神经元分化并形成突触的研究①

王聪1,杨朝阳1,段红梅2,李晓光1

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)-壳聚糖载体对神经干细胞(NSCs)的诱导分化作用。方法原代培养新生24 h Wistar大鼠脊髓NSCs,纯化后分别向培养基加入单纯壳聚糖、单纯bFGF和bFGF-壳聚糖载体。3 d后,行Nestin和β-微管蛋白Ⅲ免疫荧光染色;7 d后,行微管相关蛋白2(MAP2)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫荧光染色;14 d后,行synapsin-1和MAP2免疫荧光染色,并利用MED64平面微电极阵列记录系统检测分化后神经元的电生理活性。结果培养3 d后,各组均可见Nestin+/β-微管蛋白Ⅲ+细胞,bFGF-壳聚糖载体诱导的细胞神经丝长度大于其他两组;7 d后,各组均可见MAP2+、GFAP+和MBP+细胞,bFGF-壳聚糖载体诱导的细胞MAP2+比例高于其他两组;14 d后,bFGF-壳聚糖载体诱导的细胞呈synapsin-1+/MAP2+,且有自发放电现象。结论bFGF-壳聚糖载体诱导NSCs高比例向神经元分化,且分化而成的神经元之间形成突触,并具有电生理活性。

神经干细胞;碱性成纤维细胞生长因子;壳聚糖;神经分化;突触;神经元

[本文著录格式]王聪,杨朝阳,段红梅,等.碱性成纤维细胞生长因子-壳聚糖载体诱导神经干细胞向神经元分化并形成突触的研究[J].中国康复理论与实践,2015,21(4):406-411.

CITED AS:Wang C,Yang ZY,Duan HM,et al.Basic fibroblast growth factor-chitosan carriers induce neural stem cells to differentiate into neurons and form synapses[J].Zhongguo Kangfu Lilun Yu Shijian,2015,21(4):406-411.

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)是来源于神经系统,具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞群落[1],最初由Reynolds和Richards于1992年从成年鼠的纹状体和海马中分离得到。之后的研究表明,成年动物内源性NSCs主要位于海马齿状回颗粒细胞下层[2](subgranular zone,SGZ)、侧脑室脑室下区[2](subventricular zone,SVZ)、脊髓中央管室管膜区[3](central canal,CC)。……

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