王卫军，李世文，朱必玉，魏胜华，陶玉贵，朱龙宝

（安徽工程大学 生物与化学工程学院，安徽 芜湖 241000）

葡糖糖氧化酶（GOD，EC：1.1.3.4）能够专一性催化β-D-葡萄糖生成葡萄糖酸和H2O2，主要应用于食品、医药及化工等领域[1].然而由于游离葡萄糖氧化酶稳定性差、使用成本高，限制了其广泛应用.固定化酶具有与游离酶同样的催化特性，且易于分离回收利用，能够连续操作和有效改善酶的稳定性，近年来受到广泛关注[2].

目前，研究固定化葡萄糖氧化酶的研究比较多[3-4]，而同时固定化葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶的研究相对较少.过氧化氢酶的加入，不仅能够减轻葡萄糖氧化分解过程中产生的H2O2对酶的损伤，而且可以改变酶氧化的微环境[5]，提高葡萄糖氧化酶酶活力.固定化双酶的载体大多是多糖[6]、无机材料[7]和有机聚合物[8]，其中，聚乙烯醇与海藻酸钠复合载体以其良好的生物相容性、安全无毒、操作简单、成本低廉等优点，常作为固定化酶和细胞的载体[9-10].

实验通过制备聚乙烯醇和海藻酸钠复合载体，应用包埋法共固定化葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶，主要对制备条件进行了优化，并研究了固定化酶的性质.

1 材料与设备

1.1 材料与试剂

葡萄糖氧化酶（江苏瑞阳生物科技有限公司）；过氧化氢酶（山东枣庄杰诺生物科技有限公司）；聚乙烯醇，海藻酸钠，硼酸，氯化钙，葡萄糖，磷酸二氢钾，磷酸氢二钠，磷酸，氢氧化钠均为分析纯（国药集团化学试剂有限公司）.

1.2 仪器与设备

H H-6恒温水浴锅，HYG-3恒温摇床（金坛市杰瑞尔电器有限公司）；……