万 宇，陶 静，王 军，王华鼎，蒋 闳

（安徽省化工研究院，安徽合肥230041）

三乙磷酸铝（Fosethyl-Al）俗名疫霉灵、疫霜灵、乙磷铝、霉疫净、克霉灵、霉菌灵等，是一种广谱、低毒、安全的磷酸盐类内吸性杀菌剂，有双向内吸传导作用，在植物体内能上下传导，具有保护和治疗作用。它对霜霉属、单轴霉菌属、疫霉属引起的病害有良好的防治效果，是目前国内外防治多种果树、蔬菜霜霉病、疫病应用较多的药剂，适用于水稻、蔬菜、棉花、烟草、橡胶、胡椒、瓜类等作物，对水稻纹枯病、穗颈瘟等亦有一定的防效。

对于三乙磷酸铝的测定，文献报道有采用离子色谱法[1]、分光光度法[2-3]、络合滴定法[4]、顶空气相色谱法[5]、毛细管电泳[6]等进行含量及残留量分析，也有采用液相色谱质谱进行残留量检测[7-8]。本研究选择重氮甲烷作为衍生试剂，在酸性条件下水解三乙磷酸铝，水解后形成亚磷酸与衍生试剂反应以及甲酯化柱前衍生反应[9-10]，采用气相色谱FPD方法进行样品检测，建立了一种快速、简便的土壤和糙米样品中三乙磷酸铝残留气相色谱分析方法。该方法所用试剂简单，所用仪器常规，满足大多数残留试验室要求，且方法准确性和重现性好，可以满足土壤和糙米样品中三乙磷酸铝农药残留检测的需要。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂

三乙磷酸铝标准品（95.6%，上海安谱科学仪器公司）、异丙醇（分析纯）、硫酸、重氮甲烷（安徽省化工产品质量监督检验站制）。

1.1.2 仪器

气相色谱仪SHIMAZHUGC-2014C,配FPD（Flame Photometric Detector）检测器,日本岛津科技有限公司；十万分之一电子天平XA105DU,梅特勒托利多；涡漩振荡混合器,英国STUARTSA8；精密移液器,德国Eppendorf；氮吹仪,天津恒奥科技发展有限公司;水浴锅，江苏金坛医疗仪器厂；TDL-40型离心机，上海安亭科学仪器厂；超声波清洗器,德国Elma P系列专家型；FA25调整式匀浆器，上海弗鲁克。

1.2 方法

1.2.1 测定原理

三乙磷酸铝用稀硫酸溶液进行提取，涡漩，取部分提取清液用异丙醇稀释，在氮气流下加入重氮甲烷，在35℃恒温下进行水浴，柱前衍生试验，衍生后溶液进行浓缩定容，用于气相色谱FPD测定。

1.2.2 提取

1.2.2.1 土壤

准确称取10.0g土壤样品于50mL离心管中，加入1%稀硫酸溶液10mL，在涡漩振荡混合器上涡漩2min，超声波提取5min，在4000r/min离心5min，收集上层清液，待柱前衍生。

1.2.2.2 糙米

准确称取5.0g糙米样品于50mL离心管中，加入1%稀硫酸溶液10mL，在18000r/min调整式匀浆器上匀浆 2min，超声波提取 5min，在 4000r/min离心 5min，收集上层清液，待柱前衍生。

1.2.3 柱前衍生试验

用精密移液枪移取1.2.2.1和1.2.2.2中清液100μL于5mL刻度试管中，加入5μL 5%稀硫酸，振荡摇匀，再加入895μL异丙醇，摇匀。在氮气流下加入过量的重氮甲烷，盖紧瓶塞在35℃下水浴中反应30min，后用氮气流吹至试管中液体小于1mL（黄色褪去），异丙醇定容至1mL，用于气相色谱FPD检测。

1.2.4 仪器分析条件

气相色谱仪：岛津GC2014C，FPD（P模式）检测器；色谱柱：AgilentDB-FFAP聚乙二醇气相色谱柱，30m×0.53mm×1.0μm；进样口温度160℃，检测器温度200℃；程序升温，初始温度 60℃，保持 1min，以 10℃/min升至160℃，保持2min，再以20℃/min升至200℃，保留5min；柱压50kPa，氢气载压75kPa，空气载压50kPa，尾吹50kPa；不分流进样，进样量1.0μL。在上述色谱条件下，三乙磷酸铝衍生物保留时间约为6.2min（图 1）。

2 结果与分析

2.1 标准曲线

精确称取0.01mg三乙磷酸铝标准品于100mL容量瓶中，用10mL的纯水溶解，超声处理5min，用异丙醇定容至刻度，涡漩混匀，此标准溶液浓度为100mg/L。吸取10mL该标准溶液放入100mL容量瓶中，加入25μL 1%的硫酸，用异丙醇∶水（9∶1/V∶V）稀释至刻度，进一步稀释制成由 0.01、0.05、0.5、1.0、5.0mg/L组成的标准工作液，按1.2.3进行衍生后气相色谱FPD检测。外标法定量，以标准样品的质量浓度（X）与峰面积（Y）作线性回归分析。结果表明：在0.01～1.0mg/L浓度范围内三乙磷酸铝质量浓度与峰面积呈良好线性关系，回归方程为Y=678564X-249.75，相关系数r=0.9997，其中Y为三乙磷酸铝衍生物峰面积，X为标准溶液浓度（图2）。

2.2 最低检测量与最低检测浓度

根据添加回收试验得出土壤中的三乙磷酸铝最低检测量为0.01ng，最低检测浓度为0.01mg/kg；糙米中三乙磷酸铝最低检测量为0.05ng，最低检测浓度为0.05mg/kg。

2.3 色谱柱的选择

笔者分别选择了Agilent的DB-1、DB-5、DB-17和DB-FFAP在相同的色谱条件对气相衍生物进行色谱分析，使用AgilentDB-FFAP色谱柱进行分离的色谱峰形相对较好，峰形对称、尖锐、不拖尾，这可能与衍生物的酸性或强极性有关，而DB-FFAP是硝苯对苯二酸改性的聚乙二醇，对分离酸性、极性化合物及其酯有较好效果。从空白和添加谱图中可看出（图3～图6），杂质峰与三乙磷酸铝峰完全分离，相互不干扰，满足气相色谱分析的要求。

2.4 添加回收率与相对标准偏差

在空白土壤和糙米中添加0.01、0.1、1.0mg/L和0.05、0.1、1.0mg/L不同浓度的三乙磷酸铝标准溶液，每个添加浓度5次重复，按1.2.2和1.2.3提取、转化和衍生，按1.2.4色谱分析条件进行检测和分析。由表1知土壤中的回收率为72.6%～98.3%，变异系数为3.88%～8.35%；糙米中的回收率为82.1%～97.6%，变异系数为4.79%～6.52%。

表1 样品的添加回收率和相对标准偏差

3 结论

根据三乙磷酸铝在酸性条件下水解产生亚磷酸的特点，采用合适的衍生试剂，使得三乙磷酸铝转化成气相色谱（FPD）能够检测的甲基化衍生物，进而计算出三乙磷酸铝的残留量。该方法采用气相色谱FPD检测，样品前处理方法简单，无需复杂的净化，方法灵敏度高，抗干扰能力强，使用常规的试剂和设备，不仅满足大多数残留试验室的要求，而且满足农业部农药残留试验准则的要求。

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