钟晓锋，王 瑞，邹 慧，田 磊

（安徽贝克联合制药有限公司，安徽太和236604）

依非韦伦化学名为（4S）-6-氯-4-（环丙乙炔）-4-（三氟甲基）-苯并-1，4-二氢噁唑-2-酮，是一种抵抗艾滋病毒的非核苷类药物，由美国Merck公司研制且通过美国食品药品监督管理局（FDA）审批，于1999年2月在美国首次上市。本品对HIV-1病毒有良好的抑制作用，通过与HIV-1逆转录酶上的特定位点可逆性结合，终止RNA和DNA依赖性DNA聚合酶的活性，从而阻止病毒复制[1-3]。研究显示，依非韦伦在合成中有副产物产生，影响其产品质量，因此各国药典中对药品杂质的控制均有明确规定。《美国药典》USP 35版中罗列出依非韦伦原料药中的几种杂质，其中就有依非韦伦相关物质B即（S，E）-6-氯-4-（环丙乙烯）-4-（三氟甲基）-苯并-1，4-二氢恶嗪-2-酮。结构式如下：

为了对依非韦伦原料的质量进行研究和控制，提供该杂质的对照品，本文采用化学方法合成了该杂质，以期对依非韦伦原料药的质量控制提供指导和帮助。

1 合成路线

参考相关文献[4-6]设计依非韦伦相关物质B的合成路线如图1。

2 合成实验

2.1 仪器与试剂

1HNMR谱采用Bruker AM-400型核磁共振波谱仪测定；高分辨质谱采用Agilent6224 TOF-LC/MS测定;高效液相采用Agilent1200测定。所用试剂均为市售分析纯或化学纯。

2.2 N-（4-甲氧基苄基）-4-氯-2-（三氟乙酰基）苯胺（2）的合成

往化合物 1（50g，0.22mol）的乙腈（200mL）的溶液中加入对甲苯磺酸（0.58g，3.35mmol）。反应液在氮气保护下加热至 70℃，4-甲氧基苄醇（34g，0.24mmol）的乙腈（60mL）溶液滴加到上述反应液中，约1h滴加完毕，后保温反应2h，TLC检测反应完全。降温析出黄色固体，室温搅拌 2h，缓慢加水（200mL），室温搅拌 2h，过滤，滤饼用乙腈 /水（1∶1）洗涤，干燥得化合物（2）65g，收率84%。1H NMR（400MHz，CDCl3）δ9.04（s，1H），7.74（d，J=2Hz，1H），7.35（dd，J=2，9Hz，1H），7.24（d，J=8Hz，2H），6.91（d，J=8 Hz，2H），6.75（d，J=9 Hz，1H），4.43（d，J=6Hz，2H），3.79（s，3H）。

2.3 （S）-5-氯-α-（环丙基乙炔基）-2-[（4-甲氧基苯基）甲基]氨基- α-（三氟甲基）苯甲醇（3）的合成

在（1R，2S）-N-吡咯烷基麻黄碱（165g，0.3mol）的四氢呋喃（220mL）溶液中加入三苯基甲烷（50mg，用于引发），体系降温至-10℃，n-BuLi（1.6M正己烷溶液）直至体系变红，控温＜5℃，再加入相同量的n-BuLi，后慢慢加入环丙基乙炔（20g，0.3mol），加完后，体系在0℃～5℃下搅拌0.5h，然后降温至-55℃，加入化合物2（52g，0.15mol），得到的红色溶液在 -55℃在搅拌 1h，后用1M柠檬酸淬灭，恢复到室温后分层，有机相用1M柠檬酸洗，浓缩至剩余约150mL四氢呋喃后加入400mL甲苯，变成泥浆状，再加入120mL正己烷，搅拌1h，抽滤，滤饼依次用正己烷/甲苯（4∶1）、正己烷洗，氮气保护，干燥得到化合物（3）45g，收率 72%。1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ7.55（brs，1H），7.23（d，J=8 Hz，2H），7.13（dd，J=3，9 Hz，1H），6.86（d，J=8 Hz，2H），6.59（d，J=8 Hz，1H），4.95（bs，1H），4.23（s，2H），3.79（s，3H），2.39（m，1H），1.34（m，1H），0.84（m，2H），0.76（m，2H）。

2.4 （S，E）-5-氯-α-（环丙基乙烯基）-2-[（4-甲氧基苯基）甲基]氨基- α-（三氟甲基）苯甲醇（4）的合成

在干燥的1L三口瓶中依次加入磁力搅拌子、化合物 3（41g，0.1mol）、无水四氢呋喃（500mL），降温至 0℃～3℃，滴加四氢铝锂的四氢呋喃溶液（0.3mol），滴毕，TLC监测反应，25℃～30℃下反应48h后原料反应完全，降温至0℃～3℃，慢慢依次滴加12mL水、12mL 15%NaOHaq、36mL水。滴毕，过滤，滤饼用少量四氢呋喃洗，滤液浓缩蒸尽四氢呋喃，后加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，浓缩得（4）30g，收率 72%。1HNMR（400MHz，CDCl3）δ7.24（m，1H），7.16（m，1H)，6.88（m，2H），6.69（m，1H），5.94（d，J=16 Hz，1H），5.48（m，1H），4.22（s，2H），3.79（s，3H），1.51（m，1H），0.82（m，2H），0.44（m，2H）。

2.5 （S，E）-5-氯-α-（环丙基乙烯基）-2-氨基- α-（三氟甲基）苯甲醇（5）的合成

在 500mL三口瓶中加入化合物 4（30g，72.84mmol）、甲苯（130mL），冰浴下滴加 DDQ（16.54g，72.84mmol）的甲苯（90mL）溶液，滴毕，反应液室温搅拌2h，过滤，滤饼用甲苯洗涤，滤液用5%NaHCO3洗，40℃下蒸尽甲苯，用甲醇带两次，直至甲苯几乎完全蒸尽。再次溶于180mL甲醇，加热至 40℃，滴加 5NNaOH（66mL），滴毕，保温搅拌 0.5h。慢慢滴加 NaBH4（772mg，20.4mmol） 的 0.5N NaOH（8mL）溶液，反应液继续搅拌15min后降至室温，用冰醋酸调pH=8，缓慢滴加水（200mL），滴毕，室温搅拌1h，过滤，滤饼水洗，干燥得到淡黄色固体氨基醇（5）17g，收率 58%。ESI-HR-MSm/z：292.0736[M+H]+。

2.6 （S，E）-6-氯-4-（环丙乙烯）-4-（三氟甲基）-苯并-1，4-二氢恶嗪-2-酮（6）的合成

在250mL三口瓶中依次加入8g化合物5、40mL甲苯，室温下滴加KHCO3（5.5g，54.85mmol）的水（22mL）溶液。三光气（2.93g，9.87mmol）的甲苯（30mL）溶液滴加到上述体系中，反应液室温搅拌1h，加入甲醇（2mL）淬灭反应，分出有机相，饱和碳酸氢钠水溶液洗，水洗，干燥，浓缩得黄色油状物。加入50mL正己烷、10mL甲苯，加热回流溶解澄清，慢慢降至室温，析出白色固体，过滤，滤饼用正己烷洗涤，烘干得（6）6.2g，收率71%。1H NMR（400MHz，CDCl3）δ9.2（s，1H），7.34（m，2H），6.86（m，1H），5.89（m，1H），5.51（m，4H），1.55（m，1H），0.85（m，2H），0.51（m，2H）；ESI-HR-MSm/z：340.0317[M+Na]+。

3 结论

本研究合成了依非韦伦相关物质B，并通过高分辨质谱、核磁共振氢谱等方法进行了结构确证。与购买的USP标准品进行HPLC比对分析，保留时间完全吻合，因此合成的依非韦伦相关物质B能够满足依非韦伦质量研究需要，对依非韦伦的质量控制具有重要意义。（此文得到了岳祥军博士的精心指导，在此深表感谢！）

[1]Kahn J.O.，Walker B.D.Acute Human Immunodeficiency Virus Type1 Infection.New Engl[J].J.Med.，1998，339：33-39.

[2]Corbett J.W.，Ko S.S.，Erickson-Viitanen，S.K.，et al.Data on DPC 961 and DPC 963.Presented in part at the 4th International Congress on Drug Therapy In HIV Infection[J].Glasgow，Scotland，November，1998：8-12.

[3]Corbett J.W.， Ko S.S.， Rodgers J.D.， Bacheler.L.T.，et al.Expanded-Spectrum Nonnucleoside Reverse Transcriptase Inhibitors Inhibit Clinically Relevant Mutant Variants of HumanImmunodeficiency Virus Type 1[J].Antimicrob Agents Chemother，1999，43：2893-2897.

[4]Michael E.P.，Rodney L.P.，Jr.Lilian A.R.， et al.Practical Asymmetric Synthesis of Efavirenz（DMP 266），an HIV-1 Reverse Transcriptase Inhibitor[J].J.Org.Chem.，1998，63：8536-8543.

[5]JeffreyW.C.，Soo S.K.，James D.R.，Lisa A.G.，etal.Inhibition of Clinically Relevant Mutant Variants of HIV-1 by Quinazolinone Non-Nucleoside Reverse Transcriptase Inhibitors[J].J.Med.Chem.，2000，43：2019-2030.

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