杜迎刚，赖钟雄，张 忠

(1.潍坊科技学院，山东寿光262700，2.福建农林大学园艺学院，福建福州350002，3.泰山医学院生命科学学院，山东泰安 271000)

家蝇Musca domestica L.隶属双翅目Diptera、环裂亚目Cyclorrhapha、蝇科Muscidae，是世界各地最常见和经常出没于人畜居住环境的蝇种，也是大多数地区的优势种，与人类关系极为密切，能够传播霍乱、伤寒、结核、痢疾等多种人类疾病(陈晓敏，2009)和携带猪繁殖与呼吸综合征病毒(路宪礼等，2012)等，是重要的媒介昆虫。

从1956年中国政府公布了农业四十条除四害开始，全国上下开始了对人畜居住场所和周围环境家蝇的治理，而施用化学农药是最快最有效的降低和控制家蝇密度的方法，随着杀虫剂的大量施用，很多场所的家蝇得到了有效控制，但一些特殊场所像垃圾处理场、禽畜养殖场等环境的家蝇数量仍很大并对人类的生活造成很大干扰，同时，农药的大量使用还导致了家蝇抗药性等系列问题的发生(张铮等，2012;刘阳等，2013)。这样寻求独特作用机理的杀虫剂或简便有效的施药方法成了人类近来关注的焦点，一些生物杀虫剂如白僵菌就是在这种背景下逐渐被人们认可并用在了包括家蝇在内的多种害虫的防治上(赵学球等，2007;张亚平，2014)。但其单独对害虫的控制效果往往不佳 (徐艳聆等，2009;康曼，2011)，为此，我们兼顾常规杀虫剂的优点，把从云南罹病家蝇体表分离到的球孢白僵菌(命名为球孢白僵菌F08 菌株)的孢子粉和家蝇的理想防治药剂奋斗呐(曾晓芃等，2001)一起，利用具有良好吸附缓释性能的麻绳为载体制成了双效毒蝇绳，对其室内笼中、猪舍、垃圾处理场3种环境条件下对家蝇的杀灭效果和白僵菌的致病情况进行了研究，以期对白僵菌的应用及家蝇和其它双翅目害虫的防治提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试虫源

室内试验及菌种扩繁所用家蝇为泰山医学院媒介生物学研究室2005年建立的室内试验种群。幼虫用奶粉∶酵母∶麦麸∶水(10∶1∶75∶130)饲养，成虫用奶粉∶红糖(1∶3)饲养，饲养笼为30 cm×30 cm×45 cm 不锈钢笼外加80 目尼龙网。饲养温度25℃±1℃，相对湿度70%±5%，光照L∶D=12∶12 (7∶00-19∶00)。

1.1.2 球孢白僵菌孢子粉

球孢白僵菌F08 菌株采自云南罹病家蝇体表，现保存于泰山医学院媒介生物学研究室。该菌株用家蝇成虫连续复壮3 次后接种至马铃薯葡萄糖琼脂培养基(potato dextrose agar，PDA)中纯化，扩繁。7 d 后采收并用真空冷冻干燥制得孢子粉，含孢量约8.04×1010个/g，含水量为5.38%。

1.1.3 毒蝇绳

球孢白僵菌毒蝇绳:将蜂蜜、红糖等质量混合并稀释成140 g/kg，将直径为0.5 cm 的细麻绳剪成50 cm 小段，浸泡其中30 min，取出晾干后在球孢白僵菌F08 菌株的分生孢子粉中滚动，使麻绳表面沾满孢子粉(约3 g/绳)，即为球孢白僵菌毒蝇绳。

奋斗呐毒蝇绳:将蜂蜜、红糖和5%的奋斗呐可湿粉剂等质量混合，配成200 g/kg 的溶液，将直径0.5 cm 长50 cm 的细麻绳浸泡其中30 min，取出晾干后即为奋斗呐毒蝇绳。

双效毒蝇绳:将奋斗呐毒蝇绳在球孢白僵菌F08 菌株的分生孢子粉中滚动，使其表面沾满孢子粉，即为双毒蝇 (专利号CN201210082901.0)。

1.2 试验方法

1.2.1 室内试验

试验在泰安家蝇自然种群较大的8月份于室内全天阳光直晒不到的地方进行(气温20-35℃，多阴天)。取生测笼 (30 cm×30 cm×45 cm)12 个，随机分成4 组，其中1 组顶端悬挂仅浸泡蜂蜜、红糖混合液的麻绳为对照，另3 组分别悬挂上述3种毒蝇绳，每笼接入羽化后2 d 的家蝇30头，笼内提供人工饲料(奶粉、白糖1∶3 混合)和饮水，每12 h 收集并记录死亡蝇体，依据(1)、(2)式计算防治效果和校正防治效果;死亡蝇体置于培养箱内25℃保湿培养，观察感染球孢白僵菌的情况，以(3)式计算感病率。

1.2.2 室外试验

猪舍:于泰安家蝇自然种群较大的8月份(气温20℃-35℃，多阴天)选取相距50 m 以上的猪舍12 间，随机分成4 组，在猪舍顶棚距离地面1.5 m 处悬挂各种毒蝇绳和仅浸泡蜂蜜、红糖混合液的对照麻绳，每平方米1 条。分别于挂绳前、挂绳后1 周和2 周于猪舍内随机网捕3 次并记录捕获的家蝇数量，根据(1)、(2)式计算防治效果和校正防治效果;于猪舍周围分别收集死亡蝇体，带回实验室，根据收集地点分别置于培养箱内25℃保湿培养，计录感染球孢白僵菌蝇体的数量，根据(3)式计算感病率。

垃圾处理场:选取12 个独立的垃圾处理场，随机分成4 组，试验方法同上。

1.3 数据处理方法

用SPSS 19.0 对数据进行平方根反正弦处理后，进行单因素方差分析，用Duncan 氏新复极差法进行差异性检验。

2 结果与分析

2.1 3种毒蝇绳在不同场所对家蝇的控制效果比较

从表1 可以看出，无论室内还是室外试验条件下，双效毒蝇绳对家蝇的控制效果都优于奋斗呐毒蝇绳和球孢白僵菌毒蝇绳。3种环境条件下，双效毒蝇绳对家蝇的校正防治效果与球孢白僵菌毒蝇绳的防治效果差异极显著(P＜0.01);且在猪舍环境条件下，1 周后其校正防治效果与奋斗呐毒蝇绳组有显著差异(P＜0.05)，2 周后差异极显著(P＜0.01)。同时，奋斗呐毒蝇绳组的校正防治效果显著高于球孢白僵菌毒蝇绳组，在室内试验条件下1 周时有极差异显著 (P＜0.01)，2 周后也显著差异(P＜0.05);在猪舍条件下，两者差异极显著(P＜0.01)，在垃圾处理场，两者在0.05 水平上显著差异。

表1 3种毒蝇绳在不同场所对家蝇的防治效果Table 1 The control effect of Musca domestica caused by three poisonous fly ropes under different conditions

2.2 不同场所不同毒蝇绳致死家蝇的感病情况

不同毒蝇绳中的球孢白僵菌对致死家蝇的感病率不同场所单独比较而言，无论在1 周还是2 周时，球孢白僵菌仅在室内笼中时对家蝇的感病率在球孢白僵菌毒蝇绳组和双效毒蝇绳组存在极显著差异(P＜0.01)，而在猪舍或垃圾处理场环境条件下无显著差异(P＜0.05)。3种试验条件下的感病率对比而言，室内笼中的球孢白僵菌毒蝇绳组与猪舍和垃圾处理场试验条件下的球孢白僵菌毒蝇绳和双效毒蝇绳组有极显著差异 (P＜0.01);双效毒蝇绳组1 周时在室内与垃圾处理场间有显著差异(P＜0.05)，2 周时分别与猪舍和垃圾处理场间有显著差异(P＜0.05)和极显著差异(P＜0.01);同时，2 周时死亡家蝇的感病率在室内双效毒蝇绳组和垃圾处理场球孢白僵菌毒蝇绳组也表现出显著差异(P＜0.05)(表2)。

表2 不同毒蝇绳中的球孢白僵菌在不同试验场所对家蝇的染病情况Table 2 The infection rate of Musca domestica caused by Beauveryia bassiana in different poisonous ropes under different conditions

3 分析与讨论

双效毒蝇绳对家蝇的控制效果仅在猪舍环境时与奋斗呐毒蝇绳间存在差异(P＜0.05) (表1)，这与不同环境的小气候有关。因室内笼中，家蝇与各种毒蝇绳随机接触的机会多;而垃圾处理场不断受到人类清理垃圾活动和机器运转的干扰，生境不稳定，不利于家蝇的繁衍还造成对种群的驱赶。在室外环境中，糖蜜麻绳对照组(CK)和奋斗呐毒蝇绳组死亡家蝇的感病率虽很低但不像室内环境时为零(表2)，这可能与球孢白僵菌毒蝇绳或双效毒蝇绳致死家蝇在死亡前的迁移有关，这利于球孢白僵菌在家蝇种群中的扩散和蔓延，利用家蝇的长期控制，这正是双效毒蝇绳优于奋斗呐毒蝇绳之处;但2 周时和1 周时感病率增加不明显，这与球孢白僵菌孢子萌发对湿度等条件要求较苛刻(徐艳玲等，2009;关兵兵，2014)和8月份泰安气候较干燥有关。

在室内条件下，球孢白僵菌致死家蝇的感病率与双效毒蝇绳致死家蝇的感病率存在极显著差异(P＜0.01)，但无论在猪舍还是垃圾处理场，它们之间不存在显著差异(P＜0.05)(表2)，也就是说室外条件下球孢白僵菌F08 菌株与奋斗呐具有很好的兼容性，这与徐艳聆等(2009)、蔡悦等(2011)的研究一致。室内存在差异的原因与奋斗呐的速效性有关，即很多家蝇在染菌前已被奋斗呐毒死。2 周和1 周时球孢白僵菌对致死家蝇的感病率比较而言，球孢白僵菌毒蝇绳组和双效毒蝇绳处理组死亡家蝇的感病率在室内条件下较稳定，而在猪舍和垃圾处理场环境条件下的明显降低(表2)，这与室外紫外线对球孢白僵菌致病力的影响(潘志萍等，2008;徐艳聆等，2009)及风不利于分子孢子在毒蝇绳表面的粘附有关，这也是该毒蝇绳需要改进的地方。

白僵菌是一种寄主范围非常广的虫生真菌，其通过穿透昆虫体壁引起侵染而致昆虫死亡，对人类、环境、作物和天敌安全，国内外已有几家公司如Boverin、Mycotrol-ES、江西九江天人生态股份有限公司对其一些种类进行了登记注册(张亚平，2014)，但因其致病过程需要环境、菌株和寄主三者的协同作用(关兵兵，2014)，因而产品性能稳定性差，虽很多学者对其剂型(应盛华，2001;朱明媛，2012;李姗等，2014)和使用技术等方面进行了大量的研究，但多局限在以喷洒为主的剂型方面。双效毒蝇中白僵菌以干粉状态存在，有利于孢子生活力的保持，同时该毒蝇绳还浸有蝇类的食物诱剂和杀虫介质奋斗呐，使用方法中又充分考虑了家蝇喜欢绳上栖息及倒挂取食的习性(杜迎刚等，2008)，所以对家蝇有较理想的控制效果。

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