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超声评价蛋白多糖对关节软骨水合作用的影响

2015-11-05杨依依王青牛海军冯前进陈武凡

解放军医学杂志 2015年3期

杨依依,王青,牛海军,冯前进,陈武凡

关节软骨是一种表面光滑、富有弹性的结缔组织,可减少运动过程中骨面之间的摩擦,能够最大限度地吸收、缓冲应力作用[1]。关节软骨主要由大量细胞外基质与散在分布其中的软骨细胞组成,主要成分包括水(占软骨组织净重的60%~80%)、蛋白多糖(proteoglycan,占5%~10%)、胶原蛋白(collagen,占10%~20%)。软骨基质成分丢失和关节结构破坏是骨性关节炎的早期病理特征[2]。蛋白多糖是由大量的聚氨基葡萄糖通过连接蛋白连接于透明质酸链上,可吸引大量水分子形成凝胶,具有良好的弹性和膨胀能力。胰蛋白酶是一种蛋白溶解酶,能降解软骨内的蛋白多糖,从而破坏软骨的水合功能,使关节软骨失去弹性和抗压性。软骨成分改变可导致关节软骨退化,表现为软骨组织结构及其生物力学、组织学、生物化学性质改变[3-4]。本研究应用高频超声测量技术观察了蛋白多糖降解导致的关节软骨水合膨胀行为的改变,旨在探讨蛋白多糖对软骨水合作用的影响。

1 材料与方法

1.1 实验材料 选取12块成年猪的新鲜髌骨,关节软骨表面光滑无破损,置于–20℃冰箱保存待用。以髌骨的外侧部分作为超声扫描部位。

实验前,将样本置于磷酸缓冲溶液(PBS)中解冻2h(室温保持25℃)。将12块猪髌骨软骨样本随机均分为2组:正常组作为参考样本,不做任何处理;胰蛋白酶消化组在0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液中浸泡8h,以消化软骨组织内的蛋白多糖,建立蛋白多糖降解软骨的离体退化模型,模拟自然骨性关节炎的软骨退化。……

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