陈锦成，冯贤巧，苏丹萍，陈志科，陈敏鸿，贺东生*

（1.广州市南沙区大岗镇畜牧兽医站，广东 广州 511470；2.阳江市畜牧科学研究与技术推广中心，529500；3.华南农业大学，510640）

一例猪乙型脑炎、猪伪狂犬病与猪圆环病毒病2型混合感染的诊断

陈锦成1，冯贤巧2，苏丹萍3，陈志科2，陈敏鸿3，贺东生3*

（1.广州市南沙区大岗镇畜牧兽医站，广东 广州 511470；2.阳江市畜牧科学研究与技术推广中心，529500；3.华南农业大学，510640）

猪乙型脑炎是由乙型脑炎病毒（JEV）引起的人兽共患传染病。猪是JEV的主要储存宿主，其感染一般呈现猪-蚊-人的链状方式。猪感染乙型脑炎后主要表现为怀孕母猪流产、产死胎或木乃伊胎，公猪睾丸炎以及少数仔猪呈神经症状，常给养猪业造成巨大的经济损失。

猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病毒（PRV）引起的猪的急性传染病。可引起妊娠母猪流产、死胎、公猪性功能低下，新生仔猪的大量死亡，育肥猪呼吸困难、生长停滞等，是危害全球养猪业的重大传染病之一。

猪圆环病毒病是由猪2型圆环病毒（PCV2）感染导致的猪的一种免疫抑制性疾病，主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合征、保育猪和育肥猪的呼吸道疾病及肉芽肿性肠炎，并可使怀孕母猪繁殖障碍。其高感染率给养殖户造成严重的经济损失。

本研究针对广东某规模化养殖场发病情况、临床症状、剖检观察及实验室检测诊断为猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬及猪2型圆环病毒混合感染。

1　材料与方法

1.1临床诊断与病料的采集

图1　病猪的病理变化图

2014年9月，广东某猪场发生怀孕母猪发生流产，产木乃伊胎，产房仔猪出现发烧、呼吸困难、腹泻，部分有神经症状。病死仔猪剖检可见脑出血水肿，肝、脾和肾有坏死灶；全身淋巴结肿大出血；肺淤血、水肿等为主要临床特征。无菌采集病死猪的脑、肝脏、脾脏、淋巴结、等病变组织，作为临床组织病料样品，进行实验室诊断。

1.2细菌培养

无菌取脑、肝和脾等病变脏器，分别接种于麦康凯和营养琼脂等培养基，37 ℃培养24 h，观察培养结果。同时，取病料进行涂片，经革兰氏染色和瑞氏染色，镜检观察。

1.3病毒核酸检测

病料经适当处理后，利用TAKARA MiniBEST Viral DNA/ RNA Extraction Kit Ver 5.0试剂盒提取DNA及RNA，采用PCR和RTPCR方法对CSFV、PRRSV、JEV、PPV、PRV和PCV2进行检测。

2　结果

2.1细菌检测结果

经接种培养后，各培养基中未见病原细菌生长；涂片镜检未见可疑病原细菌分布。

2.2PCR及RT-PCR检测结果

琼脂糖凝胶电泳结果显示，采集病料中CSFV、PRRSV和PPV的RTPCR/PCR扩增结果均为阴性，部分样品的JEV、PRV和PCV2的扩增结果呈阳性，结果见图2、图3和图4。

根据临床诊断和实验室诊断结果，确诊为猪乙型脑炎、猪伪狂犬病和猪圆环病毒混合感染。

3　防治措施

3.1 猪乙型脑炎病

预防的根本在于消灭蚊虫，搞好环境卫生，做好疫苗免疫接种。常用的疫苗为乙脑弱毒疫苗，应在乙脑流行前使用，多选择在每年的4月至5月中旬。接种对象为初产母猪。同时，猪乙型脑炎为人兽共患，其传播媒介为蚊虫，因此在该病流行期间，对于疫区内的人也要接种乙脑疫苗，避免人兽共患的情况发生。

3.2猪伪狂犬病

发病时应将发病猪群隔离饲养，做好环境卫生控制；对发病猪猪舍及其周边环境进行全面消毒，采用“全进全出”的生产模式。选用优质高效的猪伪狂犬基因缺失弱毒苗（gE、TK基因缺失）加强免疫；健康猪群仔猪3日龄内滴鼻免疫，2月龄再肌注免疫1次，种公母猪每3个月普免1次，后备母猪配种前免疫2次。

图3　JEV RT-PCR检测结果

图4　PRV PCR检测结果

图5　PCV2 PCR检测结果

3.3猪圆环病毒病

猪场应采取预防为主的方针，综合防治，才能达到减少或避免损失的目的。对新引进种猪要进行检测，不引进带毒种猪。实行全进全出饲养模式；坚持对猪瘟、口蹄疫、高致病性猪蓝耳病等重点疫病及细小病毒病、猪伪狂犬病的程序免疫，严格实施生物安全措施，控制并发、继发感染；根据不同日龄适时调整饲料配方，保证猪群营养水平，增强自身抗病能力。

4　讨论

猪乙型脑炎病、猪伪狂犬病和猪圆环病毒病均是危害养猪业的重要疫病。蚊虫在猪乙型脑炎的传播中扮演了关键的角色，蚊虫感染乙型脑炎病毒后呈终身感染，并且病毒可经虫卵传代，因此防蚊灭蚊是防治乙脑的重要措施。近年来出现的猪伪狂犬变异株也使得许多猪场的猪伪狂犬疫情时有发生，现有的猪伪狂犬疫苗对猪伪狂犬变异株有一定的作用，应全面加强免疫。猪圆环病毒病是一种以免疫障碍为特征的猪的病毒性传染病，单纯有猪圆环病毒2型感染发病的很少见，该病的混合感染现象发生广泛，发病率与死亡率都很高，是当今乃至日后相当长时期内对养猪业危害最为严重的疫病之一。

本次疫情究其原因，分析可能是由于该猪场管理水平较低，疫苗免疫不确实，导致猪只免疫力下降并发病。在结合发病情况、临床症状、剖检病变的基础上，根据实验室PCR诊断结果，确诊本次广东省某集约化猪场发生的疫情为猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病毒及猪圆环病毒2型的混合感染，通过加强饲养管理，做好灭蚊灭鼠工作，优化免疫程序，提高免疫效果和猪群对疫病的抵抗力，采取一定的综合防治措施，加强卫生和饲养管理，并积极采取有效的对症疗法，稳定并控制疫情，确保了猪场的健康发展。

2015-11-22）

2012番禺市科技局和广东省农推（［2013］185）项目资助

贺东生