张福帅

（庆云县人民医院重症医学科，山东 德州 253700）

脓毒症患者机体免疫变化与病情严重性的相关性分析

张福帅

（庆云县人民医院重症医学科，山东 德州 253700）

目的 分析不同程度脓毒症患者机体细胞免疫水平的变化。方法 选择2013年12月至2014年12月山东省庆云县重症医学科诊断脓毒症患者120例，依据入院24 h内病情程度将患者分为脓毒症组、严重脓毒症组与脓毒症性休克组各40例，取门诊健康查体者30例作为对照组。入组患者分别于发病后24 h内晨空腹抽取肘静脉血，利用流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群免疫指标：CD4+T细胞、CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）、辅助T细胞17（Th17）亚群水平及Treg/Th17比值变化。相关性分析Treg/Th17比值与APACHE-Ⅱ评分关系。结果 发病后，3组脓毒症患者CD4+T细胞、Treg、Th17细胞水平与对照组比较明显升高，随病情程度加重，4组患者水平差异有统计学意义（P＜0.05）。但Treg/Th17比值随病情加重，比值逐渐降低，4组比较，水平差异有统计学意义（P＜0.05）。Treg/Th17比值与APACHE-Ⅱ评分呈直线负相关（r=-0.503，P＜0.05）。结论 脓毒症患者发病后，机体细胞免疫水平呈现不同程度反应性增加。随着病情发展变化不同，机体呈现不同程度的免疫反应。脓毒症患者病情越重，机体表现免疫抑制增加。辅助性T细胞17与调节性T细胞比例失衡，CD4+T淋巴细胞调节功能紊乱。Treg/Th17比值与反应脓毒症患者病情程度评分APACHE-Ⅱ评分呈直线负相关。

脓毒症；免疫失衡；相关性

脓毒症是临床重症医学研究重点，具有发病率高，病情重，病死率高特点。脓毒症以体内严重炎性反应失衡为主要病理特点。促炎反应/抑炎反应失衡是临床发病的主要基础。现代免疫学研究［1-2］证实，脓毒症患者继发性脏器损伤与免疫应答反应失衡关系密切。抑制性T细胞与辅助性T细胞比例失衡可能是严重脓毒症病情发展的主要原因之一。课题分析不同程度脓毒症患者机体细胞免疫水平的变化，探讨其与脓毒症病情严重程度之间相关性。

1　资料与方法

1.1研究对象：选择2013年12月至2014年12月山东省庆云县重症医学科诊断脓毒症患者120例，依据入院24 h内病情程度将患者分为脓毒症组、严重脓毒症组与脓毒症性休克组各40例，取门诊健康查体者30例作为对照组。对照组男18例，女12例，年龄（58.85±5.05）岁。脓毒症组40例，男21例，女19例，年龄（58.94±5.27）岁。严重脓毒症组40例，男20例，女20例，年龄（58.59±5.92）岁。脓毒症性休克组40例，男21例，女19例，年龄（60.04±7.28）岁。脓毒症诊断标准：①诊断符合2012年国际严重脓毒症及脓毒症性休克诊治指南。②脓毒症、严重脓毒症、脓毒症性休克分型参照指南进行。剔除标准为：①免疫结缔组织疾病；②3个月内服用激素类及免疫调节剂者。本研究已获医院医学伦理委员会批准，所有治疗方案获得患者或者家属的知情同意，并与患者家属签署知情同意书。

表1　4组患者细胞免疫水平变化（）

表1　4组患者细胞免疫水平变化（）

注：APACHE-Ⅱ：急性生理学及慢性健康状况评分。*：与对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）

组别　　例数　APACHE-Ⅱ（分）　Treg（%） 　Th17（%）　Treg/Th17对照组　30　-　4.89±0.81　2.15±0.46　2.05±0.67脓毒症组　40　17.95±3.71*　8.93±1.43*　4.94±0.86*　1.87±0.76*严重脓毒症组　40　25.84±3.80*　11.76±2.31**　6.94±1.31*　1.53±0.81*脓毒症性休克组　40　34.72±4.16*　15.90±2.87*　8.61±1.85*　1.04±0.83* F -2.904　2.891　3.075　3.189 P -0.005　0.005　0.003　0.003

1.2研究方法：入组患者分别于发病后24 h内晨空腹抽取肘静脉血，完善相关化验检查，利用APACHE-Ⅱ评分反应脓毒症患者病情严重性。检测患者外周血T细胞亚群免疫指标： CD4+T细胞、CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）、辅助T细胞17（Th17）亚群水平及Treg/Th17比值变化。相关性分析Treg/Th17比值与APACHE-Ⅱ评分关系。检测方法测定淋巴细胞表面各种荧光素的荧光强度，以二维散点图储存，Cellques软件分析数据，记录阳性细胞百分率。流式细胞仪及Cellques软件均购自美国BD公司，Ficoll 淋巴细胞分离液（美国Sigma公司产品）。

1.3统计学分析：采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析，计量资料用（）表示，采用F检验分析；相关性分析采用Spearson相关性分析，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2　结 果

细胞免疫水平变化：发病后，3组脓毒症患者CD4+T细胞、Treg、Th17细胞水平与对照组比较明显升高，随病情程度加重，4组患者水平差异有统计学意义（P＜0.05）。但Treg/Th17比值随病情加重，比值逐渐降低，4组比较，水平差异有统计学意义（P＜0.05）。Treg/Th17比值与APACHE-Ⅱ评分呈直线负相关（r=-0.503，P＜0.05）。见表1、图1。

图1　Treg/Th17与APACHE-Ⅱ评分相关性

3　讨 论

严重脓毒症患者是以细菌等病源微生物及其释放分泌毒素损伤机体组织细胞功能为主要发病机制。严重脓毒症发病机制较为复杂。既往认为［3-4］，细菌、病毒等刺激释放的细胞因子介导的炎性爆发性反应是组织细胞损伤的主要原因。现代医学研究［5］显示，机体的免疫功能可能也参与严重脓毒症的发生、发展。免疫应答通过主要组织相容性复合体递呈T淋巴细胞，继而激活细胞免疫系统，诱发CD4+T细胞增殖。CD4+T细胞分为两个亚群：辅助性T细胞（Th17为代表）与调节性T（ Treg）细胞。Th17细胞主要分泌白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-a等促炎因子。Treg细胞分泌白细胞介素-10、TGF-β1等抑炎因子。Treg/Th17比值的平衡是脓毒症病情好转的关键。急性生理学及慢性健康状况评分（APACHE-Ⅱ）是临床评价严重脓毒症患者病情严重程度的主要评价指标。其临床评分高低与预后关系密切。为进一步探讨不同程度的脓毒症患者外周血中CD4+T细胞、CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）、辅助T细胞17（Th17）亚群水平及Treg/Th17比值变化。进一步分析Treg/Th17比值与APACHE-Ⅱ评分关系性，课题试展开分析。

课题研究发现发病后，3组脓毒症患者CD4+T细胞、Treg、Th17细胞水平与对照组比较明显升高，随病情程度加重，4组患者水平差异有统计学意义（P＜0.05）。研究结果表明脓毒症患者随着病情发展变化，其免疫炎性反应呈增加趋势，机体处于一种复杂的动态免疫平衡状态。随着病情进一步加重，至脓毒症性休克阶段，Treg/ Th17比值随病情加重，比值逐渐降低，4组比较，水平差异有统计学意义（P＜0.05）。相关性分析显示Treg/Th17比值与APACHE-Ⅱ评分呈直线负相关（r=-0.503，P＜0.05）。Th17是近年来研究较多的一种CD4+T细胞亚群。Th17是主要的促炎细胞，Treg细胞具有广泛的抑制功能，可以同时抑制Th17细胞的产生。辅助性T细胞亚群和调节性T细胞亚群之间的动态平衡对于维持机体自身免疫平衡稳定具有重要作用。任何炎性反应的产生及恢复均伴随着免疫平衡系统关系的破坏。临床研究表明［6］，Th17与Treg之间存在一种漂移关系。即Th17与Treg细胞间的比例平衡关系破坏可能在脓毒症患者发病中占有重要地位。

课题研究结果表明脓毒症患者发病后，机体细胞免疫水平呈现不同程度反应性增加。随着病情发展变化不同，机体呈现不同程度的免疫反应。脓毒症患者病情越重，机体表现免疫抑制增加。辅助性T细胞17与调节性T 细胞比例失衡，CD4+T淋巴细胞调节功能紊乱。Treg/Th17比值与反应脓毒症患者病情程度评分APACHE-Ⅱ评分呈直线负相关。

［1］陈俊，寿松涛，崔书章.脓毒症患者T细胞亚群变化及其临床意义［J］.中国急救医学，2009，29（2）：110-112.

［2］吴玉章.T细胞免疫识别研究进展［J］.中国医药生物技术，2010，5（2）：81-83.

［3］程靳，李霞，周智广.T细胞免疫在肥胖状态下脂肪组织炎症发生中的作用［J］.中华糖尿病杂志，2013，5（9）：572-575.

［4］王华英，翁跃颂，应华娟，等.慢性阻塞性肺疾病患者Treg/Th17细胞失与肺功能相关性研究［J］.中华微生物学和免疫学杂志，2014，34（7）：527-529.

［5］郭剑颖，何忠杰.脓毒症的免疫调理治疗 ［J］.中国急救医学，2012，32（6）：546-547.

［6］栾英译，姚咏明.脓毒症中免疫负调控途径的研究进展［J］.中国病理生理杂志，2011，27（3）：107-109.

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1671-8194（2015）27-0184-02