张 秋 李元峰 侯 超 李云霞* 仁 杰 王丽清

（颈复康药业集团有限公司 河北 承德 067000）

对近红外测定白芍中芍药苷的深入研究

张 秋 李元峰 侯 超 李云霞* 仁 杰 王丽清

（颈复康药业集团有限公司 河北 承德 067000）

目的 采用近红外光谱法快速测定白芍中芍药苷含量。方法 白芍粉碎过，过筛，压片，采用Luminar AOTF-NIR光谱仪漫反射技术采集白芍的近红外光谱，以HPLC分析值作为参照，运用多元散射校正，平滑，求导等技术队光谱修饰，结合偏最少二乘法（PLS1）建立芍药苷含量快速测定的方法。结果 采用近红法光谱法能够快速测定白芍中芍药苷的含量，经外部预测，预测值与真实值的相关系数达0.9936。结论 该方法准确、无损失、无污染、简便、快速的绿色分析技术，可实现白芍大规模的快速检测。

近红外光谱法；化学计量学方法；白芍；HPLC；芍药苷

1　仪器与试药

1.1仪器：Luminar AOTF-NIR光谱仪（济南金宏利实业有限公司）；Agileng1100高效液相色仪（安捷伦科技有限公司）；YP-2压片机（上海山岳科学仪器有限公司）；梅特勒AE240电子天平（瑞士梅特勒集团有限公司）；KQ-500DE超声波（昆山市超声仪器有限公司）；万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）。

1.2试药：乙醇（天津佳兴化工玻璃仪器工贸有限公司20140304）；磷酸（天津市北联精细化学品开发有限公司20130113），乙腈（Fisher 134145），纯化水，芍药苷（中检所110736-201337）。

1.3样品：不同产地的54批白芍经颈复康药业高级鉴别师商春丽鉴定为毛茛科植物芍药Paeomia lactiflora Pall的干燥根。

2　方法与结果

2.1近红外光谱的采集：将54批样品粉碎过四号筛，每份2克，压片，扣除背景，采集光谱，采集方法：采集区域1100～2300 nm，每片反正面各取5个点，扫描次数300，增益2，温度（25±2） ℃，相对湿度（45%～50%），十张光谱再去平均光谱，为供试品光谱。

图1

图2

图3

表1　模型建立完成，以54批样品在模型的内部验证表

2.2近红外光谱分析：图1是54批样品的原始光谱，样品比较复杂，但很相似，需进一步对光谱处理，才能建立模型，对芍药苷进一步分析；图2是经多元散射校正，消除颗粒分布不均匀及颗粒大小产生的散射影响，转化成吸收光谱，经一阶微分，可有效地消除基线和其他背景的干扰，分辨叠加峰，提高分辨率和灵敏度，九点平滑所得图谱，用来消除噪音［1-7］。由图2可看出，光谱差异性比较小，主成分变化明显，可用于建立模型。

2.3模型的建立：光谱经处理导入计量学软件（The Unscrambler）进行分析。全光谱建立模型，主成分因子太多，过拟合现象严重，影响模型的准确性。对应《中国药典》方法测定芍药苷含量［8］，求出的真实值，运用偏最小二乘法（PLS1）多次验证，最后确定，主成分因子数选择为5，模型光谱区间为1620～1700 nm，建立模型效果较好，见图3。相关系数为0.9159 验证均方差0.3067。表1是模型建立完成，以54批样品在模型的内部验证。

2.4结果：由表2知，预测值与真实值有一定差距，但是可以接受的，建模数据仅有54批，数据量建模太少，随着样品量的增加，模型进一步修饰，效果会更好。

表2　数据验证结果表

3　讨 论

近红外测定时，受外界物理因素影响很大，如温度、湿度、颗粒大小、压力等等，样品经四号筛过滤，用固体粉末压片，再进行近红外光谱仪的测定，减少样品的消除颗粒分布不均匀及颗粒大小产生的散射的现象，同时样品受外界影响因素较小了，样品更加稳定，是样品光谱更加稳定。实验经偏最小二乘法（PLS1）测得，影响芍药苷含量的近红外光谱区间是1620～1700 nm，使实验的准确性大大提高。

近红外测定白芍中芍药苷准确、无损失、无污染、简便、快速的绿色分析技术，可实现白芍大规模的快速检测，前景有很大发展。

［1］田高友，袁洪福，褚小立，等.结合小波变换与微分法改善近红外光谱分析精度［J］.光谱学与光谱分析，2005，25（4）：516-520.

［2］褚小立，袁洪福，陆婉珍.近红外分析中光谱预处理及波长选择方法进展与应用［J］.化学进展，2004，16（4）：528-541.

［3］高荣强，范世福，严衍禄，等.近红外光谱的数据预处理研究［J］.光谱学与光谱分析，2004，24（12）：1563-1567.

［4］王一兵，千红宇，翟宏菊，等.近红外光谱分辨率对定量分析的影响［J］.分析化学，2006，34（5）：699-701.

［5］夏柏杨，任竿.近红外光谱分析技术的一些数据处理方法的讨论［J］.光谱实验室，2005，22（3）：629-634.

［6］郝勇，陈斌，朱锐.近红外光谱预处理中几种小波消噪方法的分析［J］.光谱学与光谱分析，2006，26（10）：1838-1841.

［7］田高友，袁洪福，刘慧颖，陆婉珍小波变换用于近红外光谱性质分析［J］.分析化学，2004，32（9） .1125-l130.

［8］国家药典委员会.中华人民共和国药典［M］.一部.北京：化学工业出版社，2005：96-97.

Research on Near Infrared Determination of paeoniflorin in Radix Paeoniae Alba

ZHANG Qiu，LI Yuan-feng，HOU Chao，LI Yun-xia，REN Jie，WANG Li-qing
（Jingfukang Pharmaceutical Group Co.，Ltd.，Chengde 067000，China）

Objective Using near infrared spectra method for rapid determination of paeoniflorin in radix paeoniae alba.Methods Radix paeoniae alba crushing，sieving，tabletting，adopting Luminar AOTF-diffuse NIR spectrometer technology acquisition near infrared spectrum of radix paeoniae alba，HPLC was used to analyze the value as a reference，use the multiple scattering correction，smooth，derivative spectrum modification technology team，combined with partial least squares （PLS1） to establish a method of rapid determination of paeoniflorin content.Results Using the method of near red spectrometry to rapid determination of the content of paeoniflorin in radix paeoniae alba，the external prediction，prediction and the real value of the correlation coefficient of 0.9936. Conclusion The method is accurate，no damage，no pollution，simple and rapid analysis of green technology，which can realize mass rapid detection of radix paeoniae alba.

Near infrared spectrometry；Chemometrics methods；Radix paeoniae alba.HPLC；paeoniflorin

R282.710.3

B

1671-8194（2015）27-0052-02

E-mail：cdjfk-lyx@163.com