杨冬丽* 张东阁 王春民 王 成

（颈复康药业集团有限公司，河北省中药新辅料工程技术研究中心，河北 承德 067000）

柴芩软胶囊中正己醛的含量测定

杨冬丽* 张东阁 王春民 王 成

（颈复康药业集团有限公司，河北省中药新辅料工程技术研究中心，河北 承德 067000）

目的 建立柴芩软胶囊中正己醛GC含量测定法。方法 采用GC法，DB-225（15 m×0.25 mm）石英毛细管柱，FID检测器，程序升温系统进行检测。结果 正己醛的线性范围是38.88～388.8 μg/mL（r=0.9998）。回收率为97.2%。结论 该方法简便快速，样品使用量少，可用于柴芩软胶囊中正己醛的含量测定。

柴芩软胶囊；正己醛；气相色谱

柴芩软胶囊处方中含有柴胡、黄芩、山豆根、葛根、升麻、薄荷油。具有疏肌解表，清透表里的作用，主要用于感冒风热证。柴胡挥发油为其有效成分之一，现行质量标准中未对其进行检测。柴胡挥发油具有解热、镇痛、抗炎、保肝等作用，研究表明含有挥发油的柴胡浸膏较不含挥发油的柴胡浸膏具有明显的抗炎、镇痛、解热作用［1］。且南、北柴胡挥发油对不同致热源致热的家兔均有一定的解热作用［2］。柴胡挥发油可能作用于下丘脑体温调节中枢，从而抑制体温调定点的上移［3］。其挥发油中低分子醛酮部分为抗炎的有效成分［4］，回归分析和相关分析结果表明正己醛、正庚醛、（E）2-庚烯醛、2-戊基呋喃等与柴胡挥发油的药理作用密切相关，各种物质共同构成柴胡挥发油药效的物质基础［5］。因此，本研究以正己醛为指标，建立柴芩软胶囊中柴胡挥发性成分进行含量测定方法，进一步完善质量标准，控制产品质量。

1　仪器与试药

Agilent 7890A气相色谱仪，Agilent G4513A自动进样器，J&W DB-225 15 m×0.25 mm石英毛细管柱，正己醛对照品（天津市光复精细化工研究所，色标级含量≥99%），正己烷（天津市科密欧化学试剂有限公司，分析纯）。柴芩软胶囊（颈复康药业集团有限公司，批号398002、398005、398006）。

图1　柴芩软胶囊GC图谱 A.正己醛；B.柴芩软胶囊样品；C.阴性

2　方法与结果

2.1色谱条件：DB-225（15 m×0.25 mm）石英毛细管柱，FID检测器，检测器温度250 ℃，脉冲分流，分流比10∶1，程序升温，初始温度45 ℃，以0.5 ℃/min升温至48 ℃，然后以6.5 ℃/min升温至70 ℃，保持3 min；再以25 ℃/min升温至210 ℃，保持5 min。载气氮气，进样量1 μL。

2.2对照品溶液的制备：取正己醛适量，精密称定，用正己烷配制成浓度为0.15 mg/mL的溶液。

2.3标准曲线的绘制：精密称取正己醛对照品适量，用正己烷配成浓度为1.9 mg/mL的溶液，分别精密吸取正己醛对照品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1 mL置5 mL容量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀，按上述色谱条件进样检测。以正己醛对照品的峰面积为纵坐标，浓度为横坐标（mg/mL），绘制标准曲线，计算回归方程为：Y=899.66X-5.689，r=0.9998；线性范围是38.88～388.8 μg/mL。

2.4提取溶剂的选择：取柴芩软胶囊54粒（批号398002），置500 mL圆底烧瓶中，加入水250 mL，于挥发油提取器中分别加入乙酸乙酯、石油醚、正己烷各1 mL，回流提取2 h。分别将乙酸乙酯、石油醚、正己烷层置于2 mL容量瓶中，用相应的溶剂定容，作为供试品溶液。将供试品溶液用上述GC法进行测定，外标法计算正己醛含量，结果见表1，结果表明用正己烷为提取溶剂时，样品中正己醛含量较高，因此，确定提取溶剂为正己烷。

表1　不同提取溶剂的测定结果

2.5提取时间的选择：取柴芩软胶囊54粒（批号398002），置500 mL圆底烧瓶中，加入水250 mL，于挥发油提取器中加入正己烷1 mL，共三份，分别回流提取2、3、4 h。将正己烷层置于2 mL容量瓶中，用正己烷定容，作为供试品溶液。将供试品溶液用上述GC法进行测定，外标法计算正己醛含量，结果见表2，结果表明用正己烷为提取溶剂时，提取3 h样品中正己醛含量较高，因此，确定提取时间为3 h。

表2　不同提取时间的测定结果

通过上述试验研究结果，最终确定供试品溶液的制备方法为：取柴芩软胶囊54粒，置500 mL圆底烧瓶中，加入水250 mL，于挥发油提取器中加入正己烷1 mL，水蒸气蒸馏法提取3 h。将正己烷层置于2 mL容量瓶中，用正己烷定容，作为供试品溶液。将供试品溶液用上述GC法进行测定，外标法计算正己醛含量。

2.8阴性对照液的制备：按柴芩软胶囊处方比例取除柴胡外的其他药材，按柴芩软胶囊的制备方法制备模拟阴性样品，再按供试品溶液的制备方法制备，即得。结果表明阴性无干扰。色谱图见图1。

2.9仪器精密度：取正己醛对照品溶液，重复进样6次，测定峰面积，计算RSD为：0.69%（n=6），精密度符合要求。

2.10重复性试验：取同一批次的柴芩软胶囊（批号398002），按供试品溶液的制备方法，重复处理6份，测定，计算含量，RSD为0.68%（n=6），重复性良好。

2.11稳定性试验：取同一批次的柴芩软胶囊，按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，分别于0、1、2、4、6、8 h测定峰面积，计算峰面积的RSD为0.91%。试验结果表明供试品溶液在8 h内稳定。

2.12回收率试验：取已知含量的柴芩软胶囊（批号398002）27粒，精密加入浓度为0.1555 mg/mL正己醛对照品溶液1 mL，按供试品溶液的制备方法制备，在上述色谱条件下，进样测定，计算平均回收率为97.2%（n=5），RSD为1.09%。

2.13样品测定：取3批柴芩软胶囊（批号398002、398005、398006），按供试品溶液制备方法项下操作，按上述色谱条件进行测定，色谱图见图1，结果见表3。

表3　柴芩软胶囊含量测定结果（n=3）

3批含量测定结果表明该方法准确可靠，方法学研究符合要求，可用于柴芩软胶囊中正己醛的含量测定，并为进一步控制柴芩软胶囊质量，完善质量标准提供依据。

3　讨 论

试验过程中通过对比柴胡挥发油和柴芩软胶囊挥发油的GC色谱图，最终将共有成分正己醛确定为柴芩软胶囊的指标成分。正己醛为柴胡挥发油的有效成分之一，在色谱图中该峰与其他峰分离较好，阴性无干扰。

在进行供试品溶液的制备时，发现采用柴芩软胶囊内容物进行供试品溶液的制备与直接用柴芩软胶囊进行供试品溶液的制备所得含量测定结果一致，故在供试品溶液的制备中采用柴芩软胶囊直接进行供试品溶液的制备，避免将内容物挤出时有效成分的损失。

正己醛为柴胡挥发油中的主要有效成分，对于发挥柴芩软胶囊治疗感冒的疗效起着重要作用。通过检测发现柴芩软胶囊中正己醛含量差异较大，因此有必要建立该制剂中正己醛的含量测定方法，从而更加有效的保证产品质量的稳定性。

［1］周王谊，李欣欣，莫红梅，等.两种不同挥发油含量柴胡制剂药效作用研究［J］.中药药理与临床，2012，28（1）：104-106.

［2］李秀琴，贾英，陈晓辉，等.南北柴胡挥发油解热作用研究［J］.中草药，2005，36（增刊）：162-164.

［3］孙秀萍，张宁.柴胡解热的物质基础、机制及影响因素探讨［J］.山东中医药大学学报，2009，33（4）：345-346.

［4］湖北省医药工业研究所.北柴胡挥发油解热抗炎化学成分的研究［J］.药学通报，1982，17（4）：10-13.

［5］李秀琴.柴胡质量评价方法与其相关成分的药动学研究［D］.沈阳：沈阳药科大学，2006.

R282.710.3

B

1671-8194（2015）27-0046-02

河北省自主创新重大成果转化项目（11276409Z）