李 均

(射洪县畜牧食品局太乙畜牧兽医站，629211)

鸡传染性喉气管炎（AvianInfectiousLaryngotracheitis，AILT）是一种接触性、急性上部呼吸道传染性疾病，是由传染性喉气管炎病毒引发的。鸡传染性喉气管炎会导致蛋鸡的产蛋率下降，严重者则会应窒息而出现死亡。

1 材料与方法

1.1 材料

随机选取6例患有鸡传染性喉气管炎症状的病鸡作为研究对象，采取常规实验室方法对病鸡的症状进行确诊。并随机选取6例健康鸡作为对照。所使用的试验器皿、实验仪器主要包括：三角烧杯、模具、玻璃板、打孔器、微量加样器、滴管、玻璃搅拌、石蜡切片机、恒温箱、离心机、烘片机、摊片机等。所使用的试剂主要包括：巴比妥缓冲液、磷酸盐缓冲液、酒精溶液、青霉素、链霉素、传染性喉气管炎病毒阳性血清、传染性喉气管炎阴性血清、苏木素伊红染液、石蜡二甲苯、琼脂糖以及鸡胚绒毛尿囊膜等。

1.2 方法

1.2.1 琼脂免疫扩散试验

对病鸡的气管粘膜、喉结粘膜及分泌物进行采样，按1:5的比例将其放置到磷酸盐缓冲液中（pH值为7.2），对其进行研磨，最终成为匀浆，对其进行3次以上的解溶。之后分别加入适当的青霉素、链霉素。在温度为4摄氏度的冷藏室中放置4小时，之后取出放到离心机内进行20分钟的离心处理，速度每分钟为3700转，取上清液作为病毒分离材料。遵循实验室的相关标准，制作病毒抗原。将分离材料通过使用鸡胚绒毛尿囊膜制备成抗原，再将传染性喉气管炎病毒阳性血清、传染性喉气管炎阴性血清分别与抗原放到0.45摩尔每升pH值为7.2的巴比妥缓冲液所制备的百分之一的琼脂板上。……