朱天琦 郑声星 叶绿 唐乾

DOI：10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2015.03.005

基金項目：国家自然科学青年基金（81401579）

作者单位：325000 浙江省温州， 温州医科大学附属第一医院麻醉科（朱天琦）;温州医科大学附属第二医院麻醉科（郑声星、叶绿 、唐乾）

通信作者：朱天琦，Email： skytiantian_1234@163.com

【摘要】目的 探讨脂氧素对大鼠原代肺成纤维细胞环氧合酶-2及前列腺素E₂表达的影响。方法 分离、纯化、鉴定得到大鼠肺成纤维细胞，用脂多糖（lipopolysaccharide， LPS）干预建立成纤维细胞体外急性炎症模型，并利用细胞增殖/毒性检测试剂MTT摸索出成纤维细胞急性炎症模型的最适LPS质量浓度和药物干预时间。分别应用不同浓度（0、100、200、400 nmol/mL） 的脂氧素作用于经过LPS诱导的体外培养原代肺成纤维细胞。采用酶联免疫法（ELISA）检测细胞上清液前列腺素E₂（PGE₂）水平， 同时应用Western blot检测原代肺成纤维细胞环氧合酶（COX-2）蛋白的表达。结果 用1 μg/mL LPS干预体外培养的原代肺成纤维细胞6 h能建立较为合理的急性炎症模型。脂氧素能抑制LPS诱导的原代肺成纤维细胞环氧合酶（COX-2）蛋白的表达。对照组、LPS组、LPS组与LPS+脂氧素组测PGE₂质量浓度分别为55.84 pg/mL、411.73 pg/mL、307.07 pg/mL，LPS组与LPS+脂氧素组间比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论 脂氧素能抑制LPS诱导的原代肺成纤维细胞环氧合酶-2及前列腺素E₂的表达，并呈剂量依赖性。

【关键词】脂氧素;内毒素;肺成纤维细胞;环加氧酶-2;脂多糖类

LipoxinA4 reduces lipopolysaccharide-induced expression of cyclooxygenase-2 and prostaglandin E₂in primary lung fibroblasts of rat Zhu Tianqi， Zheng Shengxing， Ye Lü， Tang Qian.Department of Anesthesia，The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University，Wenzhou 325000，China

Corresponding author：Zhu Tianqi，Email： skytiantian_1234@163.com

【Abstract】Objective To explore the effects of lipoxinA4 on expression of cyclooxygenase-2 （COX-2） and prostaglandin E₂（PGE₂） in rat primary lung fibroblast cells （LF） after lipopolysaccharide （LPS） challenge. Methods Primary lung fibroblast cells were incubated with various concentrations （0.1，1，10 μg /mL） of LPS for different lengths of time （3，6，9 h）. Then primary lung fibroblast cells were still incubated in DMEM medium containing LPS in the presence or absence of lipoxinA4. After incubation， the supernatant of medium was collected and the level of PGE₂was detected by using ELISA. The cells were harvested， and COX-2 protein was analyzed by Western blot.Results The model of acute inflammation in fibroblasts was well established by administering 1 μg/mL LPS in fibroblasts for 6 hours. Induction of COX-2 protein by LPS was inhibited by lipoxinA4. The levels of PGE₂in control group， LPS group and LPS+LipoxinA4 group were 55.84 pg/mL， 411.73 pg/mL and 307.07 pg/mL， respectively， and there was a significant difference between LPS group and LPS+LipoxinA4 group （P<0.01）. Conclusion LipoxinA4 down-regulates the expression of the COX-2 induced by LPS in primary lung fibroblast cells and consequently inhibits the production of PGE₂in a dose dependent manner.

【Key words】LipoxinA4;Lipopolysaccharide;Lung fibroblast cells;Cyclooxygenase-2;Lipopoly-saccharides

急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）是临床常见的危重病，其病死率达35%～58%[1]，内毒素血症引起的ARDS极为常见。传统观念认为急性炎症效应细胞主要有白细胞及巨噬细胞等，目前越来越多证据表明肺成纤维细胞不仅作为肺组织间质环境的主要组成部分[2]，也可以作为急性炎症效……