刘军 张朋书 徐静媛 杨毅 邱海波

DOI：10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2015.03.003

基金項目：国家自然科学基金（81070049，81170057）;江苏省“科教兴卫工程”医学重点学科项目 （889-KJXW11.3）;卫生公益性行业科研专项经费项目 （201202011）;国家临床重点专科建设项目（2100299）;中国博士后科学基金资助项目（2013M542578）;江苏省博士后科研资助项目（1301005A）;江苏省高校科研创新计划 （CX09B-066Z）;江苏省自然科学基金（BK20141175）;江苏省卫生厅科技项目（Z201414）;苏州市科技计划项目 （SYS201251）;南京医科大学哲学社会科学发展专项（2013NJZS50）

作者单位：215001 苏州，南京医科大学附属苏州市立医院东区重症医学科 （刘军）;东南大学附属中大医院重症医学科 （张朋书、徐静媛、杨毅、邱海波）

通信作者：邱海波，Email：haiboq2000@gmail.com

【摘要】目的 研究脂多糖 （LPS） 诱导急性肺损伤 （ALI） 小鼠脾脏树突状细胞 （DC） 数量改变和成熟状态，探讨ALI小鼠脾DC变化规律。方法 C57BL/6小鼠36只，随机（随机数字法）分为2组。①对照组 （Con）：小鼠气管内注射PBS 30 μL;②ALI组 （ALI）：气管内注射脂多糖 （LPS） 2 mg/kg复制ALI模型。后又按注射LPS或PBS 后6、12、24 h 三个时间点各分成三组，每组6只小鼠。光镜观察肺组织病理改变，测定肺损伤评分，计算肺湿质量/体质量比 （LW/BW），酶联免疫吸附法 （ELISA） 检测肺组织匀浆中白细胞介素-6 （IL-6） 的含量，以反映肺组织炎症损伤程度。流式细胞仪 （FCM） 检测脾单细胞悬液中DC比例及表达CD80、MHC Ⅱ水平。结果 ALI组小鼠6、12、24 h时点的肺LW/BW均明显高于对照组 （P<0.05）。病理检测示ALI组小鼠肺泡间隔增宽、充血、出血及大量炎性细胞浸润等急性肺损伤病理改变。ALI组肺损伤评分及肺组织IL-6水平均显著高于对照组 （P<0.05）。FCM检测显示，与对照组相比，ALI组小鼠脾脏DC呈一过性升高，ALI组12 h时点脾脏DC升高至 （1.92±0.25）%，显著高于对照组（P<0.01），24 h时点降至基线水平 （0.96±0.21）%。与对照组相比，ALI组脾脏DC表达CD80显著增加 （P<0.01）;与ALI组6 h相比，ALI组12 h和24 h脾脏DC表达CD80显著升高 （P<0.05）。ALI组与对照组及ALI组各时间点脾脏DC表达MHC Ⅱ的差异无统计学意义 （P>0.05）。 结论 ALI早期脾脏DC存在一过性升高，伴功能呈成熟状态，脾脏DC可能参与ALI炎症损伤的发生发展。

【关键词】急性肺损伤;急性呼吸窘迫综合征;树突状细胞;脾脏;炎症

Dynamic alteration of spleen dendritic cells in acute lung injury mice

Liu Jun， Zhang Pengshu， Xu Jingyuan， Yang Yi， Qiu Haibo.

Department of Critical Care Medicine， Suzhou Hospital， Nanjing Medical University， Suzhou 215001， China

Corresponding author： Qiu Haibo， Email： haiboq2000@gmail.com

【Abstract】Objective To investigate the kinetics and phenotype of spleen dendritic cells （DC） in lipopolysaccharide （LPS） -induced acute lung injury （ALI） mice. Methods Thirty-six C57BL/6 mice were randomly（random number） divided into two groups： control group and ALI group. Spleens were harvested at the following intervals of 6， 12， and 24 h after LPS or PBS administration. Lung wet weight /body weight ratio （LW/BW） was recorded to assess lung injury. Meanwhile， pathological changes were examined under optical microscope. The IL-6 level in the lung was measured by using ELISA （enzyme-linked immuno sorbent assay）. The DC in the spleen was measured by flow cytometry （FCM）. Results （1） LPS-ALI resulted in a significant increase in LW/BW ratio. （2） Histologically， extensive alveolar wall thickening resulted from edema， severe hemorrhage in the interstitium and alveolus， and marked and diffuse interstitial infiltration with inflammatory cells were observed in the ALI group. （3） Meanwhile， the levels of IL-6 in lung tissue were significantly increased in the LPS-induced ALI mice. （4） LPS-induced ALI led to divergent kinetics of spleen DC in ALI mice. In ALI mice， spleen DC only showed a transient increase at 12 h. （5） All DC within spleens had a modest maturation in ALI mice. Conclusions LPS-induced ALI provokes a transient increase as well as modest maturation of spleen DC.

【Key words】Acute lung injury; Acuet respiratory distress syndrome; Dendritic cells; Spleen; Inflammation

急性肺损伤 （acute lung injury， ALI） 及其严重形式急性呼吸窘迫综合征 （acute respiratory distress syndrome， ARDS） 是严重感染、创伤、休克等导致的急性难治性呼吸衰竭。……