杨婷

摘要：通过介绍人工授精技术的发展，简述人工授精技术的操作程序，并指出人工授精技术存在的问题，并对该技术的应用前景进行了展望。旨在为实际的奶牛人工授精操作提供部分技术指导和参考。

关键词：奶牛；人工授精；应用前景

中图分类号：S823.3+4 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2015）08-0050-02

采用人工授精技术，可以使优秀种公牛冷冻精液大面积推广，迅速提高后代的生产水平，避免牛群繁殖疾病的交叉传染，可防止各种疾病，提高供配种效率，降低牛群管理成本。

1 人工授精技术的发展历程

1938年至1942年间， 精子冷贮技术取得了第一次突破。将人类精液用快速冷冻法贮存于液态氮中（-196 ℃）， 复温后存活率为20%～40%， 改进技术后可达更高。但精子在冷贮过程中不可避免地受到了损伤。1949年，波尔用甘油稀释鸡的精液， 在酒精干冰（-79 ℃）下冷冻， 使部分精子保持存活， 可称为精子冷贮技术的第二次突破。此后， 由于精液冷冻保存技术的逐步成熟， 使家畜人工授精技术的发展和应用又进入了一个新阶段。20世纪70年代以来， 牛的人工授精中用冷冻精液几乎完全取代了用新鲜精液， 甚至用冷冻保存20多年的精液给母牛输精也成功生下了小牛。1980年， 中国采用冷冻精液授精的奶牛已占90%以上[1]。

2 人工授精技术要点

2.1 发情鉴定、适时配种

2.1.1 发情鉴定 母牛的发情鉴定是适时配种和提高人工授精率的重要前提。凡是接受其他牛（包括母牛）爬跨和阴部流出透明分泌物有15 cm以上的，就可以判定为发情牛。出现外阴红肿、频频叫唤、弓腰举背、排尿、追赶其他牛只时就要留意和识别发情奶牛，通常可通过外部行为进行观察，可总结为“五看”：一看外部表现。发情初期的母牛兴奋不安、反应敏感、哞叫，不接受其他牛爬跨；发情盛期则接受爬跨，被爬跨时举尾，四肢站立不动。二看外阴的变化。母牛发情时，阴户由微肿而逐渐肿大饱满，柔软而松弛，继而阴户由肿胀慢慢消退，缩小而显出皱褶。三看阴道黏膜和子宫颈口的变化。发情初期阴道壁因充血而潮红有光泽；发情盛期子宫颈红润，颈口开张，约能容纳一个手指；末期阴道黏膜充血、潮红现象逐渐消退，子宫颈口慢慢闭合。四看阴户流出黏液的变化。发情初期排出的黏液清亮，像蛋清；发情盛期母牛阴户排出如玻璃棒样，具有高度的黏性，易粘于尾根、臀端或后肢飞节处的被毛上；排卵前排出的黏液逐渐变白而浓厚黏稠，量也减少；黏性又变差，可用拇指和食指沾取少量黏液，若牵拉5～7次不断，此时母牛已接近排卵，应在3～4 h内输精，若牵拉8次以上不断者为时尚早，3～5次即断则为时已晚。五看产奶量。大多数母牛在发情时，产奶量均有所下降[2]。

2.1.2 适时配种 对鉴定发情的牛要进行适时配种。研究表明，在发情期的前期进行配种，所产母牛比例高，繁殖率不受影响；而在发情期的后期进行授精，所产公牛的比例高，并且对繁殖率有不良影响。通常9时以前发现发情，当日午后配种；9～14时发现发情，当日晚配种；下午或晚上发现发情，次日早晨配种。配种时还应注意个体差异，如体弱、老龄、肢蹄有毛病等不好确定发情时间的牛，提早排卵或排卵延迟的牛，应进行直肠检查来确定宜时的配种时间。当发情母牛阴户红肿、黏液透明、流出呈棒状，直肠检查时，卵泡发育成熟，泡壁变薄，即为最佳输精时间[3]。

2.2 精液准备

冻精品质检查方法：取冻精液前，先将1～2 mL稀释液倒入已消毒的小瓶内，置水浴锅中加温至40 ℃。经消毒后的玻棒蘸取少许解冻精液，置显微镜载玻片上进行镜检。冷冻精液解冻后精子活力不低于0.35，精子复苏率不低于50%。精子畸形率不高于20%。精子顶体完整率不低于40%，无病原微生物[4]。

2.3 冻精解冻和输精技术

2.3.1 精液解冻 精液解冻时要做到快取、快投、快融解。用镊子从液氮罐中迅速取出1支细管冻精，立即投入到38～40 ℃的温水中，摆动10 s左右使其融化，擦干细管上的水珠，用细管剪剪掉细管封口端1 cm左右，装入输精枪外套中，细管冻精封口端在前，棉塞端朝后。细管冻精直接放入（38±2） ℃水中解冻。精液解冻后必须保持所要求的温度，严防在操作过程中温度出现回升或回降，冷冻精液解冻后应在1 h 内输精[5]。

2.3.2 输精消毒 人工授精人员操作前必须剪平指甲、洗净消毒，并戴上乳胶手套、涂上润滑剂。人工授精器械使用前后必须严格消毒。玻璃器械先用温肥皂水洗刷后，用清水冲洗，然后蒸气消毒10～15 min。金属器械先用肥皂水洗净后，清水冲洗；使用前再用清水冲洗，然后经酒精火焰消毒。为防止疾病传播，必须做到每头牛用1支输精管，严禁使用未经消毒处理的输精器。

2.3.3 输精技术 配种时左手戴好长臂手套，用肥皂水沾湿后插入母牛直肠，握住子宫颈的入口处，同时胳膊向下用力开阴门，右手持输精枪由阴门插入阴道，先向上斜插一段，避开尿道口，而后平插，一直插到子宫颈口。此后要双手配合把输精枪前端引入子宫颈管内，接着再往里插，穿过2～4道皱褶样的螺旋状组织就进入了子宫体，即可将精液注入子宫体基部。注入精液时，要把输精枪稍微往后拉一下，避免输精枪口被阻。如果发现大量精液残留在输精枪内，要重新输精。输精时推射速度不宜过快，应一边推进，一边缓缓活动输精枪。输精完毕后，应用左手捏住阴唇下部有节奏地按摩几下，这样可以刺激阴蒂，提高母牛的兴奋性，从而提高受胎率。授精结束后应及时填写授精记录[4]。

2.4 解冻后精液的保存

一般常温情况下放置1 h，精液活力无明显变化，但在气温低于8 ℃时应注意保温；高于30 ℃时，将精液放置在凉水中降温，延长精子的保存时间。

2.5 重视早期妊娠检查，注意复配

母牛配种后及时进行妊娠检查。采用直肠检查，触摸子宫角的形状、大小、质地变化和卵巢、孕动脉的变化，可以诊断出妊娠时间超过30 d以上的奶牛。对已妊娠的母牛加强饲养管理，防流保胎，对未妊娠的母牛要查出原因，采用相应措施及时补救。

3 人工授精技术存在的问题及展望

3.1 发情鉴定中存在的问题

牛发情鉴定的目的是为了把发情母牛找出来，以及时配种、提高受胎率。但要注意以下情况。

3.1.1 安静发情 安静发情又称安静排卵，即母牛无发情征状，但卵泡能发育成熟并排卵。母牛分娩后第一个发情周期以及带仔的母牛或者每日挤奶次数多的母牛，年轻或体弱的母牛均易发生安静发情。

3.1.2 假发情 母牛只有外部发情表现而不排卵，但突然有性欲表现，如接受其他牛的爬跨，但阴道无黏液，子宫颈口闭锁。多数是患有子宫炎、阴道炎和卵巢机能不全的牛常有此表现。

3.1.3 持续发情 母牛连续发情不止，有的持续一周以上，其原因是卵巢囊肿，即卵泡不断发育，使母牛发情而不排卵，所以表现持续发情和卵泡交替发育，即两侧卵巢交替有卵泡发育会使母牛发情而不排卵。

3.1.4 孕期发情 直肠检查时能摸到胎儿，但有性欲表现，接受其他牛的爬跨，但阴道无黏液。其原因不清，但千万不能配种。

3.2 人工授精过程中存在的问题

3.2.1 消毒不严 授精之前如果疏忽了消毒这一环节就容易出现生殖道的疾病，子宫炎等疾病，影响了受胎率：①器材使用前后都要洗液刷洗，利用高压蒸汽或煮沸；②外阴消毒，配种前母牛外阴部清水冲洗，再用0.1%的高锰酸钾溶液清洗；③洗手消毒，最好使用消毒皂和流水洗手[4]。

3.2.2 解冻精液注意事项 提取细管放入解冻液时，一定要快、准。细管精液剪口放入输精枪后枪头略高放置，以避免精液流出，否则影响精子活力和受胎率。

3.2.3 适时输精 绝大多数的配种员都是通过观察母牛发情后确定输精时间，早上发情下午配，下午发情次日早上配，这样的方法有一定的道理，但不够准确，还需结合以下几点来准确把握输精时间：①母牛神态由不安转为安定，即发情表现开始转弱；②外阴部肿胀开始消失，子宫颈稍有收缩，黏膜由潮红变为粉红或紫青色；③黏液量由多到少且成浑浊状；④卵泡体积不再增大，皮变薄有弹力，泡液波动明显，有一触即破之感。

3.2.4 防治母牛生殖器官的各种疾病 应及早治疗母牛的子宫炎、乳房炎、各种不孕症等。母牛的不孕症除了输精液部位不正确外，还有母牛自身的生殖器官发育不正常，子宫颈狭窄、位置不正、阴道狭窄等原因。是因为输精操作失误的应加强学习、及早改正；是母牛自身疾病的应找出原因、及早治疗。母牛受胎率除了自身的不孕症以外，许多输精员在牛人工授精技术的操作上不规范，造成母牛生殖道损伤不仅降低了受胎率、扩大了胎间距，还大大降低了奶牛的产奶量，影响了经济效益。

4 小结

当前，中国奶牛人工受精技术已经很普及了，这对我国奶牛改良起到了很重要的作用，良种覆盖率不断提升，奶牛的单产量也有很大程度的提高，为我国的国民经济发展起到了推动作用。但是，必须清醒地看到，许多输精员在奶牛人工授精的操作上存在问题，给畜牧生产带来很大的损失。具体说来，不规范的牛人工授精方法会造成生殖道疾病，同时也会传播生殖道疾病，降低受胎率，降低奶牛的产奶量，影响奶牛场的经济效益。定时人工授精技术可以获得较高的受胎率。

参考文献：

[1] 孙长青.动物人工授精的意义与程序[J].养殖技术顾问，2014（5）：55.

[2] 顾桂华.顾国庆.奶牛的人工授精技术[J].畜牧兽医科技信息，2015（2）：66.

[3] 王玉亮 奶牛的人工授精技术要点[J].中国奶牛，2012（3）：53-55.

[4] 胡益源，王俊良.奶牛人工授精的关键技术[J].河南畜牧兽医：综合版，2012（10）：11-13.

[5] 巴特尔，孙 伟，苏 和，等. 用荷斯坦奶牛性控精液生产体内性控胚胎[J].动物医学进展，2012，33（4）：68-74.