孟辉 高献争 张岚 刘芳 李文才

间变性淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase,ALK）是一种酪氨酸蛋白激酶，最早在间变性淋巴瘤的一个亚型中被发现，故得此名。2007年发现在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）中，由于染色体易位引起间变性淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase,ALK）重排，导致棘皮动物微管相关蛋白4（echinodermmicro tubule associated protein like 4,EML4）-ALK融合基因形成，催化ALK激酶持续活化，激活下游信号通路，刺激肿瘤细胞的无限制增殖[1]。继表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）突变之后，ALK重排是又一个NSCLC的驱动基因，ALK重排NSCLC已经成为了肺癌的一种新的亚型。这类患者约占5%-7%的NSCLC[2]，通常预后较差[3]。临床上ALK重排的检测方法主要有荧光原位杂交（fluorescencein situhybridization,FISH）、免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）和逆转录-聚合酶链扩增法（reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR）[4]。其中FISH和RT-PCR是在基因层面上检测ALK重排，IHC是在蛋白表达层面上检测ALK重排。各种方法的灵敏度、特异性以及对标本的需求等各有不同[4,5]。FISH和PCR的灵敏度和特异性较高，适用于ALK诊断，但是这两种方法的费用较高，检测时间长。RT-PCR还需要新鲜组织，对标本需要量大。常规IHC费用较低，检测时间短，但是结果的判读有一定的主观性，可用于ALK阳性NSCLC的筛查，阳性结果需要FISH或PCR验证。增强免疫组化法（enhancing ventana-IHC,V-IHC）采用了特异性很强的抗ALK（D5F3）的兔单克隆抗体结合增强DAB染色液和增强扩增试剂盒的检测体系，使用BenchMark XT平台进行自动化染色，洗片，背景干净，阳性信号强，结果容易判定。为了在临床上准确快速地找到ALK阳性的NSCLC患者，选择一种特异，灵敏并且价廉的方法非常重要。为此本研究将利用V-IHC检测本中心172例NSCLC患者的ALK重排，阳性的患者进一步使用FISH进行验证，比较V-IHC和FISH检测方法的相关性，分析V-IHC作为临床NSCLC患者ALK重排常规诊断方法的可行性。……