张威，白艳菊*，文景芝，范国权，高艳玲，申宇，张抒，孟宪欣，王军

病虫防治

马铃薯六种主要病毒通用RT-PCR检测体系的建立

张威1，白艳菊1*，文景芝2，范国权1，高艳玲1，申宇1，张抒1，孟宪欣3，王军4

（1.黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所，黑龙江哈尔滨150086；2.东北农业大学农学院，黑龙江哈尔滨150030；3.黑龙江省农业科学院作物育种研究所，黑龙江哈尔滨150086；4.北大荒垦丰种业股份有限公司，黑龙江哈尔滨150090）

马铃薯X病毒（PVX）、马铃薯Y病毒（PVY）、马铃薯S病毒（PVS）、马铃薯卷叶病毒（PLRV）、马铃薯M病毒（PVM）和马铃薯A病毒（PVA）是马铃薯生产田中发生率较高、危害较严重的病毒，因此，建立特异性强、灵敏度高、检测速度快的RT-PCR分子检测体系对保障马铃薯种薯质量具有非常重要的意义。试验筛选了6种病毒的特异引物、优化了PCR部分的试剂以及确定了退火温度。结果表明，当Mg2+浓度为2.6 mmol/L、dNTPs浓度为0.1 mmol/L、Taq DNA聚合酶浓度为0.03 U/μL，以及退火温度为55.5℃时反应体系最稳定。最终，建立了一套通用RT-PCR检测体系，只需要变换每种病毒的引物，就可以实现对PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM和PVA病毒的RT-PCR检测。每种病毒检测灵敏度均能达到pg以上。

马铃薯；PVX；PVY；PVS；PLRV；PVM；PVA

马铃薯是世界上最重要的粮食作物之一，具有分布范围广、适应性强、产量高、用途广等特点。中国马铃薯的种植面积和总产量均居世界首位［1］，然而整体生产水平却只有马铃薯生产发达国家荷兰平均单产的32%［2］。其中病毒病是降低马铃薯种薯产量，引起种性退化的主要原因。

目前，生产上发生普遍、危害较严重的6种主要病毒有：马铃薯X病毒（PVX）、马铃薯Y病毒（PVY）、马铃薯S病毒（PVS）、马铃薯卷叶病毒（PLRV）、马铃薯M病毒（PVM）和马铃薯A病毒（PVA）［3-7］，是马铃薯产业发展的制约瓶颈［8，9］。……