木瓜蛋白酶在[Cnmim]BF4-NaH2PO4双水相体系中的分配行为
2015-08-21蔡涛张海德董安华彭健吴蕊朱英瑞
蔡涛,张海德,董安华,彭健,吴蕊,朱英瑞
(海南大学食品学院,海南 海口 570228)
引 言
双水相体系(aqueous two-phase system,ATPS)是指某些亲水性的高分子聚合物与聚合物或聚合物与无机盐溶解在水中,超过一定浓度时能自然地分成互不相溶的两相或多相的体系[1]。该体系具有操作简单、条件温和等特点,已广泛应用于核酸、蛋白质和病毒等生物产品的分离纯化[2-4],是一种很有前景的新型分离技术。
离子液体,又称室温熔融盐,是指在室温或者接近室温的情况下完全由有机阳离子和无机或有机阴离子组成的熔盐体系[5]。离子液体具有其他常规溶剂无可比拟的优点[6-10],如不挥发、无色、无臭、溶解能力强、蒸气压极低、化学稳定性好和通过正负离子可设计目标离子液体等。离子液体双水相体系(ionic liquids aqueous two-phase system,ILATPS)通常由一种有机盐(亲水性离子液体)、一种无机盐(如磷酸盐、碳酸盐、氢氧化物等)和水形成,该双水相体系综合了离子液体和双水相体系的优 点[11-12],开辟了新的萃取分离体系。但是,对于离子液体双水相系统的形成机理和目标物质在其中的分配行为及规律缺乏理论解释。
近年来,对离子液体双水相体系的研究十分活跃。王伟涛等[13]用[C4mim]Cl/K2HPO4提取木瓜蛋白酶并对其做了系统优化,木瓜蛋白酶的酶活性回收率可达到91.2%,纯化因子可以达到1.73。邓凡政等[14]用[Bmim]BF4/NaH2PO4体系对牛血清蛋白 提纯,结果表明萃取率可达到99%。Du 等[15]用[Bmim]Cl/K2HPO4体系对尿液中的蛋白质提纯,结果表明,分配系数可达到10,富集因子为5。Ruiz-Angel 等[16]用[Bmim]Cl/K2HPO4体系对卵清蛋白提纯,结果表明分配系数可高达180。……
